Чем разбавить пушечное сало: Чем разбавить пушечное сало до жидкого состояния — dvd-auto.ru — Штатные головные устройства c GPS навигацией

Содержание

Пушечное сало чем разбавить

Пушечное сало для автомобиля: как обрабатывать, чем разбавить, когда использовать

Коррозия – главный враг автомобильного кузова. Машина, которую одолела коррозия, не только имеет нелицеприятный внешний вид, но и сильно теряет в цене, что недопустимо для многих автомобилистов, продающих машины на вторичном рынке. Устранить коррозию, если она начала свое распространение по корпусу автомобиля, достаточно сложно, тогда как предотвратить ее возникновение значительно проще. Существует несколько вариантов антикоррозийной обработки кузова, и одним из проверенных годами является использование пушечного сала. Данный антикор недорогой, при этом нанести его водитель может самостоятельно, но важно сделать это правильно.

Оглавление: 1. Что такое пушечное сало для обработки автомобиля 2. Зачем используется пушечное сало 3. Обработка пушечным салом автомобиля: инструкция

Что такое пушечное сало для обработки автомобиля

Пушечное сало (или как его часто называют автомобилисты – пушсало) – это недорогой антикор, по внешнему виду напоминающий парафин или густой литол.

Основой данного средства является нефтяное масло, загущение которого происходит при помощи церезина и петролатума. Чтобы повысить эффективность данного состава, в него добавляют различные присадки, препятствующие появлению коррозии.

Зачем используется пушечное сало

Пушечное сало применяется для антикоррозийной обработки кузова автомобиля. Его преимуществом является возможность удержания на любой поверхности.

Пушечное сало невосприимчиво к воде, поэтому оно может использоваться, в том числе, для защиты от коррозии днища автомобиля и порогов. Вещество подходит, как для черных, так и для цветных металлов. При этом стоит отметить, что свои свойства пушечное сало сохраняет при температуре от -50 до +50 градусов по Цельсию.

Интересный факт: Изначально пушечное сало применялось для консервации стрелкового и артиллерийского вооружения.

Срок годности пушечного сала не ограничен.

Обработка пушечным салом автомобиля: инструкция

Процесс обработки пушечным салом автомобиля довольно простой, но важно соблюдать некоторые требования безопасности, а также обзавестись рядом инструментов. Чтобы нанести вещество на кузов автомобиля потребуется:

Пушечное сало. В магазинах чаще всего можно встретить данное вещество в контейнерах от 2 до 5 литров. В среднем, для обработки одного автомобиля уходит около 1 литра вещества;
Источник тепла. Здесь может использоваться обычная электрическая плитка, газовая горелка или что-то подобное. Источник тепла необходим, чтобы разогреть пушечное сало;
Тара. Если не планируется использовать полный контейнер пушечного сала, потребуется обзавестись тарой, в которой можно будет разогреть необходимое количество вещества;
Обезжириватель. В данном случае можно использовать обычный уайт-спирит;
Средство для нанесения. Это может быть кисточка, покрасочный пистолет или нечто подобное;
Наждачная бумага. Если на автомобиле присутствуют элементы коррозии, потребуется наждачная бумага, чтобы их предварительно зачистить.

Важно: Перед началом работ обязательно достаньте из автомобиля огнетушитель и поставьте на видное место. Поскольку выполнение работ сопряжено с использованием нагревающих элементов, есть вероятность возгорания.

Подготовив необходимые инструменты, можно переходить к работам:

Первым делом необходимо разогреть пушечное сало до жидкого состояния. Плавится данное вещество при температуре около 90 градусов по Цельсию. Рекомендуется использовать электроплиту для разогрева вещества, чтобы не использовать открытый огонь, поскольку пушсало хорошо возгорается;Обратите внимание: Перед нагревом в пушечное сало рекомендуется добавить 10-20% от объема бензина, чтобы при разогреве получить однородную массу. Также обязательно в процессе разогрева вещества его постоянно помешивать.
Также потребуется подготовить автомобиль к нанесению вещества. Для этого рекомендуется снять все пластиковые элементы, которые могут помешать проведению работ. Потребуется обязательно очистить от грязи и просушить элементы кузова, на которые будет наносить пушсало. Если имеются зачатки коррозии, удалите их при помощи наждачной бумаги. Когда кузов будет подготовлен, обезжирьте его, используя уайт-спирит или другое подобное средство;

Далее переходите непосредственно к процессу нанесения пушечного сала. Использовать для этого можно любые удобные приспособления, но проще всего выполнять работу кисточкой. При использовании кисточки делайте широкие мазки, чтобы равномерно распределить вещество по кузову. В скрытые полости нанести пушечное сало можно при помощи шприца;Обратите внимание: Если вы используете для нанесения пушечного сала распылитель, можно в процессе разогрева вещества добавлять в него отработанное машинное масло, чтобы контролировать густоту.
Когда на автомобиль будет нанесено вещество, подождите примерно час, пока оно высохнет, после чего можно надевать обратно пластиковые элементы.

Главным преимуществом пушечного сала перед другими антикоррозийными мастиками является его долгий срок службы. После обработки кузова пушсалом, пройдет не менее 4 лет, прежде чем придется наносить вещество вновь, тогда как обычные мастики заменять необходимо каждые 1,5-2 года.

Есть и недостаток у пушечного сала – его липкость. Даже после застывания к веществу достаточно сильно прилипает дорожная грязь, но эта проблема решается мойкой.

(323 голос., средний: 4,44 из 5) Загрузка…

Обработка пушечным салом. — Лада Калина Универсал, 1.6 л., 2012 года на DRIVE2

Решил обработать заднюю часть авто пушсалом.Снял бампер, капу, вентиляционные решетки, фары, уплотнитель.всё снимается без проблем.Дальше смываем грязь, обезжириваем, сушим кузов.В это время растапливаем пушсало(похож он на парафин кстати)растапливал с помощью баллончика газа в кастрюле, дымит немного но это терпимо, плавиться начинает при t90с.а при t примерно 100с становиться полностью жидким,1:1 разбавляем бензином.Работать нужно предельно осторожно так как используется открытое пламя рядом с взрывоопасными веществами!

Пушсало быстро застывает, для периодической растопки рядом в ведре кипятильником подогрел воду.После полной растопки начинаем наносить пушсало кисточкой либо компрессором.я наносил кисточкой.и еще момент такой:в дальние углы сзади изнутри пушсало можно залить с помощью большого шприца, случайно под руки шприц попал и мне сразу пришла такая мысль в голову)просто набираем его в жидком состоянии и резко внутрь брызгаем, получается не хуже пульвелизатора)Работать нужно быстро и аккуратно.После обработки, сборка всего снятого в обратной последовательности.Лет на 5-6 про ржавчину в задней части можно забыть, надеюсь)

Цена вопроса: 200 ₽ Пробег: 3654 км

Пушечное сало vs Мастика (эксперимент) — Renault Scenic, 1.6 л., 1999 года на DRIVE2

Не секрет, что борьба со ржавчиной — больная тема для каждого автолюбителя. Так же не секрет, что неправильная обработка может только усугубить процесс ржавения. В этой статье хочу рассказать про свой личный опыт противостояния со ржавью на днище авто, а так же в районе колесных арок. Проблема правильного нанесения антикорозионных веществ в этих местах заключается в том, что, как правило, не всегда удается должным образом правильно, соблюдая весь технологический процесс, подготовить поверхность к такой обработке. Причины этому следующие: не везде можно подлезть инструментом для качественной зачистки металла и не желание либо отсутствие времени на выжидание времени высыхания каждого слоя. К примеру: дождаться полного высыхания антикора у меня никогда не хватало терпения, а потом его еще нужно повторно зачистить и обезжирить. Да ну его нафиг: 20 минут высыхания антикра (а точнее, начинаю с зада, пока до переда дошел, зад уже и готов:), с большего — щеткой по металу, брызнул растворителя и понеслась… битум, мастика. Короче марудная эта работа. Из личного опыта, тренировки начинались еще в лет 16 на отцовской шестерке, потом на В3 Пассате, использование различных битумов, мастик и просто смолы не приносит желаемого результата даже в тех местах, где возможность качественно подготовить поверхность имеется (и даже с нанесением грунта). Сказать, что на моем гарбузiке на 100% идеальное днище нельзя (годы все-таки как-никак), но и явных критических очагов не наблюдается. Однако процесс гниения идет, особенно в труднодоступных местах, где подлезть можно разве что отверткой, слегка поковыряв заводской слой. Особенно я был удивлен, когда перебирал кулису и пришлось снять защитные кожухи над глушителем. Вот здесь-то и идут скрытые процессы гниения. Подлезть инструментом мало где удастся. Но лечить этот псориаз надо, если собираешься ездить. Использовать чисто битумы и мастики уже не собираюсь. Ерунда это все. Слышал про еще одно бюджетное средство — пушечное сало. Приобрел. Возможно то, что надо. Можно наносить прямо по ржавчине и не гемороиться. Однако имеет недостаток — смывается с открытых участков в течении года. Процедуру мазьни придется повторять почти каждый год. Больше используется для скрытых поверхностей. Поскольку обработку днища и колесных ниш собираюсь производить в конце июля (отпуск), то решил провести для себя небольшой эксперимент с использованием оставшейся мастики и пушечного сала. Суть эксперимента: проверить на собственном опыте, стоит ли смешивать мастику с пушечным салом и можно ли будет этой смесью обрабатывать открытые участки днища. Конечный 100% результат будет известен в июне 2018, когда подопытные образцы металла пролежат под открытым небом и пройдут жару, дожди, сырость, снег, морозы, снова дожди и снова жару. Описаний подобных экспериментов в интернете много, но я ставлю цель проверить именно смесь пушечное сало+мастика в пропорции 1:1 с нанесением на поверхность металла с различными видами предварительной обработки.

Полный размер

Мастика, пуш. сало, смесь мастика+сало, антикор, грунтовка

Полный размер

Растворитель, лидская эмаль

Полный размер

Подопытные образцы: 1. Просто ржавый металл 2. Ржавый металл зачищенный до блеска 3. Новый лист металла с большего зачищенный до блеска обработанный антикором 4. Новый лист металла с большего зачищенный до блеска обработанный антикором, (выдержка 2 часа) и обезжиренный растворителем 5. Ржавый металл зачищенный до блеска, обезжиренный, обработанный антикором с выдержкой 2 часа, зашкуренный, вновь обезжиренный и прогрунтованный

Полный размер

2 (сверху дополнительно промазал салом участок, где ржавчина отваливалась кусками)

Полный размер

5 (оставалось место помазал краской)

Вот такие очаги ржавчины у меня

и вот такие

Не думаю, что явный результат будет известен уже через месяц, к этому времени я уже хочу чем-нибудь да мазать. Больше склоняюсь к следующему варианту: во вскрытые полости понагнетать чисто сала, а по наружке пройтись, хотя бы даже и для профилактики, мастикой с салом. В прошлом году имел опыт задувания компрессором (не жалея) во вскрытые полости Мовиля, как результат ржавчины внутри лонжеронов на просвет фонариком нет, но и Мовиля там тоже больше нет, видимо куда-то за зиму подевался. Может кто-то уже имел опыт смешивания данных веществ, поделитесь результатом. Ну, а результаты опыта — через год, но, если явно проявится лидер, того и раньше.

Цена за банку сала — 8р, мастика старая (лет 5 ей), преобразователь (якобы преобразователь в грунт) — первый попавшийся за 3р 50 коп. + все остальное было в наличии = за все приблизительно 30р

Цена вопроса: 30 ₽ Пробег: 296500 км

Page 2

Полный размер

Мастика, пуш. сало, смесь мастика+сало, антикор, грунтовка

Полный размер

Растворитель, лидская эмаль

Полный размер

2 (сверху дополнительно промазал салом участок, где ржавчина отваливалась кусками)

Полный размер

5 (оставалось место помазал краской)

Вот такие очаги ржавчины у меня

и вот такие

Цена вопроса: 30 ₽ Пробег: 296500 км

D-Day или как я перестал бояться и полюбил ПВК. — УАЗ Patriot, 2.7 л., 2015 года на DRIVE2

Введение.По многочисленным просьбам сфотографировал пневмосистему. Собирается легко, фитинги все обошлись в 1000р.+ 1300 набор их Леруа. Бюджетно.

Общий вид

2 точки подключения нагрузка и ресивер через беркутовский ниппель

Тройник крупным планом

ПВК или пушечное сало. Мифический антикор, о котором все слышали, но нигде не делают.

Вопрос делать или не делать антикор не стоял. Также не стоял вопрос ехать ли на сервис — не ехать. Нчего хорошего там не сделают.Вопрос стоял чем делать. Обычно я использую РАСТ-стоп, но внезапно он пропал из продажи до декабря.Всякие динитролы дороги и не вызывают доверия. Тектил ещё дороже.

Мовили текут, плохо распыляются и не очень как антикор.

Осталось пушсало.Процесс требовал пневмосистемы (см. предыдущию тему) и большой пляски с бубном по приведению его в нужное агрегатное состояние.

Для начала нужно правильно одеться:

Fallout ready

И подготовить кухонный уголок. Газовая плита (особенно семейным людям), как и близость жилья категорически не рекомендуется, во избежания множественных тупых травм.

Уголок

Далее, пушсало обязательно надо греть на водяной бане, если не хотите, чтобы Вас номинировали на премию Дарвина.Также никогда не используйте бензин как растворитель. Надписи на банках с ПВК сделаны исключительно для введения в заблуждения неприятеля.

Бензин легко летуч, легко воспламеняем и токсичен. Используйте уайт-спирит. Им не отравитесь.Но противогаз крайне желателен.

Разводим смесь:2 кг пушсала2 л уайт-спирита

200 мл. масла (не используйте отработку, вы же тухлятину не едите? А машина почему должна?)

Греем всё это до полного растворения пушсала естественным путём (без интенсивного мешания).Греть придётся всё время обработки (несколько часов), поэтому запас топлива и надёжная подставка для ведра с водой, которое будем греть обязательны.

Пистолет тоже следует подготовить. Надеть на носик шланг диаметром 13 мм. около 20 см длинной.Очень длинный или тонкий сильно ухудчшает качество распыла. А все открытые поверхности обрабатывать вообще без шланга. Факел распыла шикарен.

Далее разогреваем пистолёт феном, заливаем грамм 500 раствора и пока не остыл вдуваем куда дотянемся.

К бою готов!

2-х килограмм сала хватает покрыть все доступные снизу скрытые полости и днище. И ещё на раму хватит.

Покрывает пушсало очень необычно.

Вреде и нет ничего, а на самом деле пара мм диетического, легко усвояемого …

Оно не течет, если не поливать из шланга. Попадая на поверхность раствор резко охлаждается и становится вязким. И лежит там, куда положили. Очень удобно.

Распыл настолько хорош, что следы обработки я находил под обивкой передних стоек! А снаружи вся машина была покрыта тонким слоем антикора.3 часа оттирал.

Остатки можно использовать для защиты, к примеру, швов на крыше под резинками. В отличие от многих составов резина не портится.

Машин собран, отмыт, улыбается и готов везти штурмана на соревнования.

P.S.РасходыПушсало — 2кг 200р.Уайт-спирит 2л 180р.Масло — бесплатноОбезжириватель 1л — 90р.Тряпки рулон — 180р.

Итого: 650р. Цена 1 балончика тектила.

Цена вопроса: 650 ₽ Пробег: 420 км

Мовиль или пушечное сало. Что лучше? — АвтоЖидкость

Автомобильный кузов уязвим перед факторами, вызывающими возникновение и развитие коррозии. Повышенная влажность, грязь, дорожные реагенты с агрессивными составами – всё это приводит кузовные части авто в негодность. Особенно в зоне риска находятся днище, пороги, а также скрытые кузовные полости. Что выбрать? Мовиль или пушечное сало? – это один из наиболее задаваемых автолюбителями вопросов: именно эти два средства входят в состав компонентов, предназначенных для обработки автомобильного кузова.

Что такое пушечное сало?

Пушечное сало – антикоррозийное средство, внешне напоминающее собой парафин либо густой литол. В основу состава вещества входит загущённое при помощи церезина и петролатума нефтяное масло. В промышленных масштабах пушечное сало выпускается с 70-х годов прошлого столетия, изначально средство применялось для мазки артиллерийских орудий и тяжёлого вооружения.

К преимуществам пушечного сала относят долговечность, невосприимчивость к воздействию воды и реагентов, а также отсутствие срока годности. Вещество теряет свои свойства в условиях чрезмерно низких (от -50 градусов по Цельсию), и высоких температур (от +50 градусов по Цельсию).

Перед применением средство разогревают при помощи электрической плитки или газовой горелки. Пушечное сало приобретает жидкую форму при нагреве до +90 градусов по Цельсию.

При работе с пушечным салом рекомендуется соблюдать меры предосторожности – вещество легковоспламеняемо, и иметь под рукой огнетушитель.

С автомобиля снимают пластиковые элементы, мешающие нанесению защитного средства, тщательно моют и обезжиривают обрабатываемые поверхности. Пушечное сало наносят на детали широкими мазками кисти. Для обработки скрытых полостей кузова пушсалом, используют шприц.

Пушечное сало также можно наносить и при помощи распылителя, для регулировки густоты средства, используют отработанное машинное масло.

Пушечное сало имеет четырёхлетний срок службы, и надёжно защищает обработанные кузовные части от коррозии. К недостаткам пушечного сала относят трудоёмкость нанесения и легковоспламеняемость. Также нанесённое пушечное сало даже в остывшем состоянии достаточно липкое, из-за чего на него прилипает пыль и грязь (проблема решается мойкой автомобиля).

Что такое мовиль?

Мовиль – антикоррозийное средство, состоящее их моторного масла, олифы и особых антикоррозийных веществ. Мовиль достаточно популярен среди автомобилистов, во многом благодаря низкой цене и высокому качеству. Мовиль выпускается в трёх формах:

Для нанесения вещества используют различные приспособления, в зависимости от формы Мовиля. Перед обработкой деталь очищают от грязи, устраняют отшелушившуюся краску и покрывают преобразователем коррозии. Также необходимо перед нанесением Мовиля обезжирить рабочую поверхность.

Антикоррозийное вещество наносят равномерным слоем. Автомобиль можно эксплуатировать через несколько дней после обработки – нанесённому Мовилю нужно время, чтобы высохнуть.

Повторную обработку Мовилем выполняют через 1,5-2 года эксплуатации автомобиля

Мовиль или пушечное сало?

Пушечное сало считают эффективным и надёжным антикоррозийным средством. Однако использование вещества трудоёмко, и опасно. Мовиль проще нанести, средство идеально подходит для обработки скрытых полостей кузова автомобиля. Тем не менее, пушечное сало обеспечивает более надёжную защиту кузовных деталей авто от разрушения. Консистенция смазочного материала, а также высокая долговечность (после обработки деталей, можно 4 года эксплуатировать машину без риска возникновения коррозии и «жучков») – основные преимущества пушечного сала. Мовиль защищает кузовные детали авто от коррозии на протяжении 1,5-2 лет.

Пушечное сало ч.1 — Лада 2114, 1.6 л., 2013 года на DRIVE2

Сегодня наконец-то нашел время чтобы заняться обработкой скрытых полостей. Решил обработать правый порог, обе правых колесных арки, а так же пролить лонжерон. Сначала снял задний подкрылок, места где вкручиваются саморезы начали немного ржаветь

— зачистил и покрыл эпоксидным и акриловым грунтами.

Снял все заглушки. Кстати, на обработку пуш салом меня вдохновила эта статья www.drive2.ru/l/4897057/Только там владелец авто использовал Раст стоп, у меня его не было. Вообще я и раньше слышал про пушечное сало но нигде в Красноярске не смог его найти! Пришлось покупать по интернету с доставкой. Купил я кстати Смазку ПВК то есть на коробке не написано пушсало, но смазка пвк это и есть пушсало, убедитесь тут ru.wikipedia.org/wiki/Пушечное_сало

Полный размер

по консистенции как литол даже погуще немного

Так как сало нужно разбавить маслом чтобы оно не застывало, я купил тэп-15.

Пропорции не знаю, лил на глаз. после остывания оно не превращается в литол, становиться немного жидким.

Тем самым в жару оно станет еще более жидким а зимой не замерзнет. Заливать в скрытые полости нужно горячим, чтобы лучше растеклось. И обязательно заткните дренажные отверстия, хотя бы тряпками!

А вот когда мазал арки, мазал естественно кистью, то горячее сало сильно текучее и постоянно капает то на руки то на пол. Поэтому мазал теплым. Так же густо промазал торец крыла, и обратную сторону. Порог обработал как внутри так и снаружи. А вообще зря я обрабатывал правый порог резино-битумной мастикой. Нужно было сразу мазать салом. Для обработки скрытых полостей использовал большой шприц и резиновый шланг.

С передней аркой провернул те же самые операции. Работа это весьма тяжелая и очень грязная, но оно того стоит

А вот что будет если дренажи не заткнуть))

На порог, лонжерон, телевизор, 2 арки у меня ушло 2,7 кг. Мазал и лил я очень щедро))

И не верьте в сказки что если помазать пороги снаружи мастикой они никогда не сгниют — машина гниет изнутри! Поэтому обрабатывать надо скрытые полости в первую очередь!

Цена вопроса: 0 ₽ Пробег: 113000 км

Page 2

— зачистил и покрыл эпоксидным и акриловым грунтами.

Полный размер

по консистенции как литол даже погуще немного

Так как сало нужно разбавить маслом чтобы оно не застывало, я купил тэп-15.

Пропорции не знаю, лил на глаз. после остывания оно не превращается в литол, становиться немного жидким.

С передней аркой провернул те же самые операции. Работа это весьма тяжелая и очень грязная, но оно того стоит

А вот что будет если дренажи не заткнуть))

На порог, лонжерон, телевизор, 2 арки у меня ушло 2,7 кг. Мазал и лил я очень щедро))

Цена вопроса: 0 ₽ Пробег: 113000 км

Пушсало — что это такое и чем оно нравилось советским автовладельцам и военным | Мир Смазок Все о маслах, смазках

Пушсало – это слово часто можно услышать из уст автомобилистов, родившихся в СССР. Некоторые из них до сих пор используют этот некогда популярный смазочный материал для защиты транспортных средств от коррозии.

Давайте разберемся, что представляет из себя это средство, почему оно, собственно — «Пушсало», для чего применяется и по каким характеристикам оно выигрывает у многих аналогичных современных смазок.

Пушечное сало

Немного истории

Материал с народным названием «Пушсало» изначально имел чисто военное предназначение. Он был разработан в начале 70-х годов XX века для защиты стрелкового и артиллерийского вооружения, а также другой военной техники от коррозии, которая часто возникала в условиях складского хранения. Консервационная смазка получила название УНЗ.

Затем состав доработали, и в серийное производство вышла «смазка пушечная ПВК». Свое разговорное обозначение – «пушечное сало», или, сокращенно, «пушсало» – она получила благодаря напоминавшим настоящее сало цвету, консистенции, а также области применения.

Характеристики и сферы применения пушсала

Пушсало изготавливается из нефтяного масла, загущенного петролатумом и церезином, с добавлением антикоррозионной присадки. Внешне данная смазка напоминает литол, цвет однородной мазеобразной массы варьируется от желтого до коричневого.

Внешний вид Пушсала

Основными рабочими характеристиками пушсала являются:

высокая адгезия, способность удерживаться на наклонных и вертикальных поверхностях
хорошие консервационные свойства
водостойкость
работоспособность в диапазоне температур -50… +50 °С

Главное предназначение пушечного сала не изменилось за более чем полувековую историю – защита изделий из черных и цветных металлов от коррозии.

Сегодня пушсало используется не только в качестве консервационной смазки для оружия и военной техники, но и при изоляции наземных трубопроводов, а также обслуживании кузовного металла автомобилей.

Как использовать пушсало в качестве антикора для автомобиля

Перед тем как применять пушсало для антикоррозионной обработки металлического кузова автомобиля, густой состав следует довести до нужной консистенции. Его нагревают и разбавляют бензином, отработанным маслом или другими растворителями.

Процесс разбавления пушсала

Машину следует предварительно подготовить: снять все мешающие пластиковые детали, тщательно очистить металл (в том числе от следов коррозии), обезжирить и высушить его.

Перед разбавлением пушсало разогревают и доводят до консистенции густой сметаны. Делается это при помощи электрической плитки или строительного фена. Разбавитель вводят в пропорции 4:1, смесь хорошо перемешивают, а затем быстро наносят на нужные поверхности кистью или распылительным пистолетом.

Внимание! Пушечное сало достаточно быстро остывает и приобретает первоначальную консистенцию, поэтому работать с ним необходимо оперативно!

При обработке днища автомобиля целесообразно подставить под него емкость, в которую будут стекать излишки пушсала. При соприкосновении с холодными поверхностями автомобильного кузова первый слой смазки быстро схватится, после чего можно нанести еще один. Толщина каждого, по советам опытных пользователей, должна составлять 0,3-0,4 мм.

Слой пушсала на днище автомобиля

Помимо днища, пушсалом можно обработать и другие детали автомобиля, наиболее подверженные коррозии: пороги и проемы дверей, металлические элементы внутри салона (правда, при их обработке не избежать довольно резкого запаха).

В труднодоступные места и скрытые полости пушечное сало наносят при помощи шприца. Через час автомобиль будет готов к эксплуатации.

Главными преимуществами пушсала перед другими антикорами являются его демократичная цена и долгий срок службы. Пройдет не менее 4 лет, прежде чем придется наносить новый слой этой смазки, тогда как обычные мастики обновляются каждые 1,5-2 года.

Основной недостаток пушечного сала – липкость. Даже после застывания вещество буквально притягивает дорожную грязь. Однако многих водителей это не останавливает, проблему они решают мойкой.

А вы когда-нибудь пользовались Пушсалом? Делитесь своим опытом в комментариях!

Если было интересно — ставьте лайк и подписывайтесь на наш канал!

Читайте и другие наши публикации:

Универсальные смазки. Наш Топ-5 аэрозольных смазок

Легендарные смазки СССР. Автол

Больше интересных статей — на сайте mirsmazok.ru

Про антикор вопросик… | SUZUKI CLUB RUSSIA

Да вы что!
Еще скажите что он нанокомпрессию двигателя не повышает и синхронизаторы не восстанавливает !

В журнале за Рулём писали что Раст Стоп очень хорошо ползёт, в общем повёлся.
Мне нужно чем то ржавые места на днище обработать, что бы убрать или тормознуть
ржавчину. Тектил я купил и начал обрабатывать, но Тектил вроде не тормозит хотя и имеет ингибиторы коррозии.

Солярка конечно ржавчину уберёт до чистого металла, но она вонючая , если результаты
с Раст Стопом не устроят, придётся соляру использовать как раньше автолюбители делали.

С РастСтопом не всё конечно так уже плохо я его нанёс на тестовую пластину есть у меня такая
которая если вечером её смочить водой на утро уже ржавчиной покрывается, так вот
я на неё нанёс РастСтоп, потом стёр его тщательно бумагой туалетной, смочил водой, пластина
не ржавеет. Похоже что РастСтоп впитался в железо.
Промыл пластину Уайт Спиритом, пишут что Спирит удаляет РастСтоп и смочил пластину водой ,
ржавчина начала появляться, то есть РастСтоп водой смывается но защитная плёнка остаётся,
убирается РастСтоп только растворителем, водой смывается только верхний слой,
возможно потому и написано в инструкции что РастСтопу нужно дать пропитать поверхность 48 часов.
Вот только что бы сделать правильные выводы нужно нанести РастСтоп и поездить, потому что не

ясно как это будет работать в реальности.

Тектил Цинк что для днища что для полостей, значительно изменился по сравнению
с тем что было раньше , цинка конечно ни какого не вижу, но тектил стал более масляный,
то есть похож на РастСтоп , если брызнуть Тектилом на бумагу то с обратной стороны
видно масло, на Тектиле без Цинка масляное пятно раз 5 меньше.
Тектиловцы явно озаботились тем, чтобы Тектил лучше пропитывал ржавчину, журнал
за Рулём тестировали антикоры и писали, что Тектил ни как не хочет пропитывать ржавчину,
но при этом всё равно присудили Тектилу 1 место.

Интересно как ведут себя ингибиторы коррозии Тектила после того как Тектил
малость затвердел , информации об этом нет ни в тестах ни у самого производителя.
Если ингибиторы перестают работать после высыхания, то получается, нанесли плёнку под
которой коррозия может и дальше развиваться.
Покрытие а вернее сами ингибиторы уже ни как обновить, новая порция ингибиторов не достанет

до металла если не смыть старый антикор или не растворить его новой порцией, но про
способность антикора проникать через прежнее покрытие нет ни какой информации ни в тестах ни у производителя.
Жидкий РастСтоп реально получится обновить, то есть можно добавить новую порцию
ингибиторов, которые имеют свойство стареть и вырабатываться.
В антикорах самое основное, что защищает от ржавчины и тормозит её это ингибиторы коррозии.

Пушсало. Обработка авто. | Свой ремонт авто, покраска, жестянка, видео, pdr

Пушсало это сейчас – скорее общее название материала для обработки внутренних полостей авто. Попадалось оно немного разного вида и разного цвета. Иногда именно в виде тёмной жирной массы похожей на солидол, иногда в виде светлой застывшей массы.
В последнее время оно всё чаще попадается “по второму типу”. Поэтому сейчас я его разбавляю дополнительно смесью мовиля и масла.

— Масло использую только новое (отработка даёт запах в салоне, а нового масла надо всего лишь минимум. Его в таком количестве совсем не жалко).
— Разбавляю – исходя из своего опыта. Опыт следующий. Один раз не разбавил пушсало и обработал им полы своей машины. Зимой поднимал “коврики” и смотрел состояние полов. Пушсало в замёршем виде легко отделялось от холодного металла слоями, практически не оставляя жирных следов на металле. Наверное сейчас такое выпускается “пушсало”.

Его, считаю, обязательно надо смешивать с мовилем и с маслом ( мовиль сейчас тоже продаётся почему то совсем не текучий, раньше бы и мовиль по жиже …)
В таком смешанном виде (пушсало + мовиль + масло) смесь дольше сохраняется именно в состоянии жирной, мягкой массы. А не становится со временем подсохшей.
Чтобы “правильно” подобрать именно вам подходящие пропорции (по желанию) надо разогреть всё это содержимое до жидкого состояния и зачерпнуть, отлить часть массы. Через минуту масса застынет и будет понятно – что она из себя представляет в конечном (застывшем) виде.

Иногда смесь пушсала с мовилем действительно очень практична (в смысле сохранности и долговечности) для сильно тронутых ржавчиной полов. Сначала, конечно, надо грубую ржавчину счистить, обработать преобразователем.

В этом случае порядок “бутерброда” такой : использовать “пушсало”, потом плёнку, потом родную шумку и потом “кавролин” пола. Я видел обработанную таким образом приехавшую с сервиса машину и поднимал у неё “полики”.
Полы действительно хорошо сохраняются. Но недостаток – всё в машине можно перепачкать при очередной разборке пола.
Эта история с обработкой полов пушсалом относится скорее к нашим б.у машинам.
В иномарках на полу пушсало использовать не стоит, у них не текут ручьями лобовые стёкла, и не течёт вода на пол.

В основном смесь пушсала я использовал для обработки скрытых полостей и особенно полостей порогов (и особенно после их переварки .
Так как не обрабатываю пушсало всю машину, придумал себе простое приспособление для закачки пушсала в полости.

Можно сделать себе такое же.
Годится для закачки во все е полости – в двери, задние арки, передние ” пистолеты”, в пороги и в принципе, в лонжероны тоже.
Я приспособил для этих целей старинный шпицеватель, кажется от Волги.
Принцип простой. Это маленький ручной насос, в котором есть хороший плотный поршень и есть длинный носик с наконечником. Наконечник надо скрутить, а кончик торчащей трубки заплющить.
Я себе его не плющил, а удлинил другой, более тонкой трубкой. Заплющил уже более тонкую трубку. Теперь отверстия в кузове “под обработку” пушсалом можно сверлить минимального размера.
Поршень возможно придётся перевернуть другой стороной. Впрочем, для начала можно попробовать пользоваться шприцевателем и не переворачивая поршень- конструкции бывают разные. На видео внизу показан шприцеватель и как им пользоваться.
Этот “насос” легко закачивает (втягивает в себя) разогретое пушсало и также легко его обратно выбрасывает.
Если резко давить на поршень- разогретое пушсало разбивается в мелкие брызги.
Можно проверить работоспособнось приспособления на открытом воздухе. Несколько метров летящей струи – вполне приличный результат…
Дальше надо просто постараться не испачкаться.
Разогреть пушсало до текучего состояния, добавить в него мовиль и немного масла (иногда и мовиль приходится разогревать – он теперь бывает не текучим).
“Втянуть” смесь в насос и выдавить в полость. Можно не сомневаться, что при большом желании через отверстие в заднюю арку (торец порога) можно обработать практически весь порог – от верха до низа – одной сплошной жирной массой. Но я так не делаю – идёт большой перерасход пушсала.
Можно хорошо обработать пушсалом нижнюю (самую уязвимую для коррозии) часть порога и не стараться “залить весь порог”.
Смесь попадая на стенки стекает по стенкам вниз и застывает. Нижняя часть порога для обработки важнее чем верхняя.
А верхнюю можно обработать мовилем методом распыления.
Я для этих целей пользуюсь “правильными” балончиками.
Многие ругают баллончики с мовилем, а я их хвалю. За удобство, за универсальнось. Опять же надо выбирать правильные баллончики (из которых мовиль выходит с давлением , а не еле вытекает). Есть хорошие отечественные балончики, есть импроhтный Тектил ML.
И второе : я баллончики с мовилем перед применением разогреваю и плющю им кончик пластиковой тонкой трубки. Тогда мовиль из балончика выдодит действительно “распылением”. В комплекте с Тектил ML вместе с трубкой даётся очень хороший наконечник-распылитель. Его можно сохранить и потом накручивать на трубку российского мовиля.
Чтобы пользоваться пушсалом экономно , надо предусмотрительно подставить пустые металлические ёмкости под все водосливы порога. Оттуда обязательно первоначально будет вытекать первая порция пушсала. Чуть позже даже такие большие отвертия водосливов порогов зальются остывшим пушсалом. Надо обязательно их потом заново “открыть”.

Видео как пользуюсь своим приспособление для закачки мовиля в полости.

Один раз я немного перестарался в обработке дверей пушсалом.
Позже мне позвонили и сказали, что в двери какие то непонятные звуки, похожие на плескание воды. Так оно и было.
Я посчитал, что случайная в дверях вода” дырочку найдёт”, но она не нашла. Отзвонился обратно и сказал – надо раскрыть “водостоки двери”. Т.е немного расковырять пушсало в этих водостоках хотя бы электродом или тонкой отвёрткой …или чем то похожим.
.
Лично я пользуюсь для разогрева пушсала “Чудо-печкой”, можно, конечно попробовать разогреть и на электрической, но только она после этой работы чистой не останется.
Если есть свой опыт общения с пушсалом – просьба поделится им в комментария внизу.

Пример использования пушсала для сохранения дверей авто

Пока нет схожих записей

Физиологический процесс похудания | Бюллетень Национального исследовательского центра

Acheson KJ, Zahorska MB, Pittet PY, Jéquier SD (2012) Метаболические эффекты кофеина у людей: окисление липидов или бесполезный цикл? Am J Clin Nutr 33 (5): 989–997

Статья Google Scholar

Аль-Гоблан А.С., Аль-Альфи М.А., Хан М.З. (2014) Механизм, связывающий сахарный диабет и ожирение. Dia Metab Syndr Obes 7: 587–591. https: // doi.org / 10.2147 / DMSO.S67400

Артикул Google Scholar

Alligier M, Meugnier E, Debard C, Scoazec J (2011) Ремодулирование подкожной жировой ткани во время начальной фазы набора веса, вызванного перееданием у человека. J Clin Endocrinol Metab 10 (15): 2314–2327

Google Scholar

Anderson G, James W, Konz E (2017) Ожирение и лечение заболеваний: влияние потери веса на сопутствующие заболевания.J Am Med Assoc. 16: 23–36

Google Scholar

Антон С.Д., Моррисон С.Д., Чефалу В.Т. (2008) Влияние пиколината хрома на потребление пищи и чувство сытости. Diabetes Technol Ther 10 (5): 405–412

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

Arciero PJ, Gardner AW, Calles-Escandon J, Benowitz NL, Poehlman ET (2007) Влияние приема кофеина на кинетику NE, окисление жиров и расход энергии у молодых и пожилых мужчин.Am J Physiol 268: 1192–1198

Google Scholar

Baglioni S, Cantini G, Poli G, Francalanci M, Squecco R, Di Franco A et al (2012) Функциональные различия подушечек висцерального и подкожного жира происходят из-за различий в жировых стволовых клетках. PLOS One 7 (5): e36569. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0036569

ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Banni S (2012) Метаболизм конъюгированной линолевой кислоты.Curr Opin. 13 (3): 261–266

Google Scholar

Belza A, Toubro S, Astrup A (2014) Влияние кофеина, зеленого чая и тирозина на термогенез и потребление энергии. Eur J Clin Nutr 63 (1): 57–64 Epub 2007 Sep 19

Статья CAS Google Scholar

Berdanier CR, Gorny JR, Joussif AE (2000) Advanced Nutrition: Macronutrients, 2nd edn. CRC Press, Бока-Ратон

Google Scholar

Бес-Растролло М., Сабате Дж., Гомес-Грасиа Е., Алонсо А., Мартинес Дж. А., Мартинес-Гонсалес М. А. (2017) Потребление орехов и увеличение веса в средиземноморской когорте: исследование солнца.Ожирение 15 (1): 107–116

Статья Google Scholar

Biesiekierski JR (2017) Что такое глютен? J Gastroenterol Hepatol 32 (1): 78–81. https://doi.org/10.1111/jgh.13703.%20PMID%2028244676

CAS Статья PubMed Google Scholar

Бирбрайр А., Чжан Т., Ван З.М., Месси М.Л., Эниколопов Г.Н., Минц А., Дельбоно О. (2013) Роль перицитов в регенерации скелетных мышц и накоплении жира.Стволовые клетки Dev 22 (16): 2298–2314. https://doi.org/10.1089/scd.2012.0647 PMC 3730538. PMID 23517218

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Bland J, Lyon M, Jones DS (2006) Клинические подходы к детоксикации и биотрансформации. J Med Assoc 5: 34–45

Google Scholar

Блюменфельд Н.Р., Канг Х.Дж., Фенцл А., Сонг З., Чанг Дж.Дж., Сингх Р., Джонсон Р., Каракесили А., Феранил Дж. Б., Россен Н.С., Чжан В., Джагги С., Маккарти Б., Бесслер С., Шварц Г. Дж., Грант R, Korner J, Kiefer FW, Gillette BM, Samuel SK (2018) Прямой подход к трансплантации тканей для увеличения эндогенного коричневого жира.Научный доклад 8 (1). https://doi.org/10.1038/s41598-018-25866-y

Бобылева В., Беллей М., Кнер Н., Ларди Х (2007) Влияние эргостероида 7-оксо-дегидроэпиандростерона на потенциал митохондриальной мембраны: возможная связь с термогенезом. Arch Biochem Biophys 341 (1): 122–128

Статья Google Scholar

Boirie M, Dangin Y, Guillet C, Beaufrere B (2011) Влияние скорости переваривания белка на обмен белка у молодых и пожилых людей.J Nutr 132 (10): 3228S – 3233S

Google Scholar

Бредсдорф Л., Ведебай Э. Б., Николов Н. Г., Халлас-Моллер Т., Пилегаард К. (2015) Кетон малины в пищевых добавках — высокое потребление, мало данных о токсичности — причина для беспокойства по поводу безопасности? Regul Toxicol Pharmacol 73: 196–200

CAS PubMed Статья Google Scholar

Brenot F, Abenhaim L, Moride Y, Rich S, Benichou J, Kurz X et al (2015) Препараты, подавляющие аппетит, и риск первичной легочной гипертензии.N Engl J Med 335: 609

Google Scholar

Brown JC, Harhay MO, Harhay MN (2017) Антропометрический прогноз висцеральной жировой ткани и смертность среди мужчин и женщин в третьем национальном обследовании здоровья и питания (NHANES III). Am J Hum Biol 29 (1): 181–195. https://doi.org/10.1002/ajhb.22898

Артикул Google Scholar

Brownell KD (2009) Greenwood MR Stellar и Eileen E (2009): Эффекты повторяющихся циклов потери и восстановления веса у крыс.Physiol Behav 38 (4): 459

Статья Google Scholar

Bucci LR (2008) Избранные травы и упражнения человека. Am J Clin Nutr 72 (2): 624S – 636S

Артикул Google Scholar

Cabrera C, Artacho R, Giménez R (2006) Благоприятные эффекты зеленого чая; Обзор. J Am Coll Nutr 25 (2): 79–99

CAS PubMed Статья Google Scholar

Cannon B, Nedergaard J, Nute GR (2018) Биология развития: ни жир, ни плоть.Nature 454 (7207): 947–958

ADS Статья CAS Google Scholar

Canoy D (2010) Распределение жировых отложений и риск метаболических нарушений у мужчин и женщин. Curr Opin Endocrinol Diabetes 17: 143–149

Статья CAS Google Scholar

Кармен Г.Ю., Виктор С.М. Сигнальные механизмы, регулирующие липолиз. Сотовый сигнал. 2006. 18 (4): 401–8. https: // doi.org / 10.1016 / j.cellsig.2005.08.009 Epub 2005 22 сентября. PMID: 16182514

CAS PubMed Статья Google Scholar

Chen M, Pan A, Malik VS, Hu FB (2012) Влияние потребления молочных продуктов на массу тела и жир: метаанализ рандомизированных контролируемых исследований. Am J Clin Nutr 96 (8): 735–747

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

Christensen R, Lorenzen JK, Svith CR, Bartels EM, Melanson EL, Saris WH et al (2009) Влияние кальция из молочных и пищевых добавок на экскрецию фекального жира: метаанализ рандомизированных контролируемых исследований.Obes Rev 10 (2): 475–486

CAS PubMed Статья Google Scholar

Cimolai N, Cimolai T, Kessel J (2011) Использование йохимбина для улучшения физического состояния и его потенциальная токсичность. J Diet Suppl 8: 346–354

CAS PubMed Статья Google Scholar

Clapham JC, Arch JR (2007) Термогенные и метаболические препараты против ожирения: обоснование и возможности.Диабет, ожирение, метаболизм 9: 259–275

CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

Коэльо М., Оливейра Т., Фернандес Р. (2013) Биохимия жировой ткани: эндокринный орган. Arch Med Sci 9 (2): 191–200. https://doi.org/10.5114/aoms.2013.33181

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Cohen PA, Wang YH, Maller G, DeSouza R, Khan IA (2016) Фармацевтические количества йохимбина, содержащиеся в пищевых добавках.Анальный тест на наркотики 8: 357–369

CAS PubMed Статья Google Scholar

Cotten BM, Diamond SA, Banh T, Hsiao YH, Cole RM, Li J et al (2017) Малиновый кетон не снижает ожирение, кроме уменьшения потребления пищи у мышей C57BL / 6, получавших диету с высоким содержанием жиров. Food Funct 8: 1512–1518

CAS PubMed Статья Google Scholar

Coyle LP, Patrick JR (2013) Abete GS (2013): Полезные факты о еде.J Med Food 35 (5): 13–19

Google Scholar

Delbeke FT, Van Eenoo P, Van Thuyne W, Desmet N (2002) Прогормоны и спорт. J Steroid Biochem Mol Biol 83 (1–5): 245–251

CAS PubMed Статья Google Scholar

Демлинг Р.Х. (2009) Влияние гипокалорийной диеты, повышенного потребления белка и силовых тренировок на набор мышечной массы и потерю жировой массы у полицейских с избыточным весом.Ann Nutr Metab 44 (1): 21–29

Статья Google Scholar

Денкер Т., Джоэл Р., Бланд Дж. (2012) Мир на тарелке, 4-е изд. Небраска: Nebraska Press

Деннис Э.А., Денго А.Л., Комбер Д.Л. и др. (2010) Потребление воды увеличивает потерю веса во время низкокалорийной диеты у людей среднего и пожилого возраста. Ожирение 18 (2): 300–307. https://doi.org/10.1038/oby.2009.235

Артикул PubMed Google Scholar

Дхаливал С.С., Велборн Т.А. (2009) Центральное ожирение и многомерный сердечно-сосудистый риск, оцененный по шкале прогнозов Фрамингема.Am J Cardiol 103 (10): 1403–1407. https://doi.org/10.1016/j.amjcard.2008.12.048

Артикул PubMed Google Scholar

Din MU, Saari T, Raiko J, Kudomi N, Maurer SF, Lahesmaa M, Tobias Fromme T, Amri EZ, Klingenspor M, Solin O, Nuutila P, Virtanen KA (2018) Постпрандиальный окислительный метаболизм коричневого жира человека указывает на термогенез. Cell Metab 28 (2): 207. https://doi.org/10.1016/j.cmet.2018.05.020

CAS Статья Google Scholar

Divoux A, Drolet R, Clement A (2011) Архитектура и внеклеточный матрикс жировой ткани.Obes Rev 12 (35): 494–503

Статья Google Scholar

Дубнов-Раз Г, Константини Н. В., Ярив Х, Ницца С., Шапира Н. (2011) Влияние питья воды на расход энергии в покое у детей с избыточным весом. Int J Obes 35 (10): 1295–1300. https://doi.org/10.1038/ijo.2011.130

CAS Статья Google Scholar

Dulloo AG, Geissler CA, Horton T, Collins A, Miller DS (2015) Нормальное потребление кофеина: влияние на термогенез и суточный расход энергии у худощавых и пострадавших от ожирения людей-добровольцев.Am J Clin Nutr 49 (1): 44–50

Статья Google Scholar

Dulloo AG, Geissler GA, Kangas AJ (2009) Нормальное потребление кофеина: влияние на термогенез и ежедневный расход энергии у худых и посттучных добровольцев. Am J Clin Nutr 49 (1): 44–50

Статья Google Scholar

Duvernoy CS (2011) Риски для здоровья, связанные с диетой йо-йо. J Med Assoc 15 (272): 1169

Google Scholar

Earthman CP, Beckman LM, Masodkar K, Sibley SD (2012) Связь между ожирением и низкими концентрациями 25-гидроксивитамина D в крови: соображения и последствия.Int J Obes (Лондон) 36: 387–396

CAS Статья Google Scholar

Экель С.Е., Долинков М.А., Дост И.К., Лацинов З.Е., Михальск Ю.Д., Халуз Д.В., Касалик Ю.М. (2005) Эндокринный профиль подкожной и висцеральной жировой ткани у пациентов с ожирением. Эндокринол клеток Mol 28 (17): 456–475

Google Scholar

Enerbäck S (2009) Происхождение коричневой жировой ткани. N Engl J Med 360 (19): 2021–2023

PubMed Статья Google Scholar

Эрик Э., Берг Д.К. (2010) 7 принципов сжигания жира, 1-е изд.Blackwell Science, Оксфорд

Google Scholar

Фаррелл Д. Д., Бауэр Л., Speedy DB (2013) Смертельное отравление водой. Дж. Клин Путь 56 (10): 803–804. https://doi.org/10.1136/jcp.56.10.803-a

Артикул Google Scholar

Fenzl A, Kiefer FW (2014) Коричневая жировая ткань и термогенез. Гормон Mol Biol Clin Investigation 19 (1): 25–37. https://doi.org/10.1515/hmbci-2014-0022 PMID 253

CAS Статья Google Scholar

Fomous CM, Costello RB, Coates PM (2002) Симпозиум: конференция по науке и политике в отношении продуктов, повышающих производительность.34 (10): 1685–1690

Fu C, Jiang Y, Guo J, Su Z (2016) Натуральные продукты с эффектами против ожирения и различными механизмами действия. J Agric Food Chem 64: 9571–9585

CAS PubMed Статья Google Scholar

Gades MD, Stern JS, Walter AH (2002) Добавка хитозана не влияет на всасывание жира у здоровых мужчин, получающих диету с высоким содержанием жиров, пилотное исследование. Int J Obes Relat Metab Disord 26 (1): 119–122

CAS PubMed Статья Google Scholar

Galitzky J, Rivière D, Tran MA, Montastruc JL, Berlan M (1990).Фармакодинамические эффекты хронического лечения йохимбином у здоровых добровольцев. Eur J Clin Pharmacol. 39 (5): 447–51. https://doi.org/10.1007/bf00280934

Gannon MC, Nuttall FQ. Влияние высокобелковой диеты на грелин, глюкагон и инсулиноподобный фактор роста-I у субъектов с ожирением. Обмен веществ. 2011 сентябрь; 60 (9): 1300-1311. DOI: https://doi.org/10.1016/j.metabol.2011.01.016. Epub 2011 15 марта

CAS PubMed Статья Google Scholar

Гиттлман А.Л. (2010) Обзор плана диеты для сжигания жира, 3-е изд.Barry Seaars, Mc Groaw-Hill

Gittleman AL (2011) Fat flush food, 4 edn. Калифорния: Сисарс Б. Мак Гроу-Хилл

Гиттлман А.Л. (2012) Сброс жира на всю жизнь: стратегия достижения целей по снижению веса, 5-е изд. Калифорния: Seasars B.Mc Groaw-Hill

Gray JA, Berger M, Roth BL (2016) Расширенная биология серотонина. Анну Рев Мед 60: 355–366

Google Scholar

Greer F, Friars D, Graham TE (2000) Сравнение кофеина и приема теофиллина: метаболизм упражнений и выносливость.J Appl Physiol 89 (5): 1837–1844

CAS PubMed Статья Google Scholar

Grier PT (2007) Гипонатриемия «водная интоксикация», 4-е изд. Филадельфия: Lippincott Williams & Wilkins

Guerre M, Millo K (2011) Гормоны жировой ткани. J Endocrinol Invest 25 (10): 855–861

Статья Google Scholar

Guo L, Gurda GT, Lee SH, Molkentin JD, Williams JA (2016) Холецистокинин активирует передачу сигналов кальциневрин-NFAT поджелудочной железы in vitro и in vivo.Mol Biol Cell 19 (1): 198–206

Google Scholar

Ha E, Zemel MB (2011) Функциональные свойства сыворотки, ее компонентов и незаменимых аминокислот: механизмы, лежащие в основе пользы для здоровья для активных людей (обзор). J Nutr Biochem 14 (5): 251–258

Статья CAS Google Scholar

Haller CA, Anderson IB, Kim SY, Blanc PD (2012) Оценка выбранных трав.Токсикол, вызывающий нежелательную лекарственную реакцию, ред. 21 (3): 143–150

Статья Google Scholar

Хармс М., Сил П., Пезешкиан С. Коричневый и бежевый жир: развитие, функция и терапевтический потенциал. Nat Med. 2013. 19 (10): 1252–1263. DOI: https: //doi.org/10.1038/nm.3361. PMID 24100998

CAS PubMed Статья Google Scholar

Harris RB (2011) Лептин — гораздо больше, чем сигнал сытости.Энн Рев Нутр 21 (6): 591–600.0

MathSciNet Google Scholar

Hofman Z, Smeets R, Verlaan G, Lugt R, Verstappen PA (2008) Влияние добавок коровьего молозива на выполнение упражнений у элитных хоккеистов на траве. Int J Sport Nutr Exerc Exerc Metab 12 (4): 461–469

Статья Google Scholar

Holm C (2009) Молекулярные механизмы, регулирующие гормоночувствительную липазу и липолиз.Biochem Soc Trans 31 (6): 1120–1124

Статья Google Scholar

Hooper EF, Maglione M, Mojica WA, Suttorp MJ, Rhodes SL, Jungvig L (2015) Снижение потребления насыщенных жиров при сердечно-сосудистых заболеваниях. Кокрановская база данных Syst Rev 10 (6): CD011737

Google Scholar

Hsueh WA, Avula B, Pawar RS (2013) Главный комплекс гистосовместимости играет важную роль в вызванном ожирением воспалении жировой ткани.Cell Metab 17 (3): 411–422

PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar

Hursel R, Viechtbauer W, Westerterp-Plantenga MS (2016) Влияние зеленого чая на потерю веса и поддержание веса: метаанализ. Инт Дж. Обес (Лондон) 33 (9): 956–961. https://doi.org/10.1038/ijo.2009.135

CAS Статья Google Scholar

Imbeault P, Pelletier C, Tremblay A (2016) Энергетический баланс и загрязнение хлорорганическими соединениями и полихлорированным бифенилом.4 (1): 17–24

Инагаки Т., Сакаи Дж., Каджимура С. Транскрипционный и эпигенетический контроль судьбы и функции коричневых и бежевых жировых клеток. Nat Rev Mol Cell Biol. 2016.17 (8): 480–495. DOI: https: //doi.org/10.1038/nrm.2016.62. PMC 4956538 .PMID 27251423.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

Ivy JL (2004) Влияние пирувата и дигидроксиактетона на метаболизм и аэробную выносливость.Медико-спортивные упражнения 30 (6): 837–843

Google Scholar

Jeukendrup AE, Randell R (2014) Жиросжигатели: пищевые добавки для похудения. Obes Rev 12 (10): 841–851. https://doi.org/10.1111/j.1467-789X.2011.00908.x

CAS Статья Google Scholar

Jeukendrup AE, Randell RE, Coates PM (2016) Жиросжигатели: пищевые добавки, которые увеличивают метаболизм жиров.Obes Rev 12 (10): 841–855

Статья CAS Google Scholar

Джонсон Р., Брайант С., Хантли А.Л. (2012) Зеленый чай и зеленый чай для здоровья. J Am sci 23 (7): 81–95

Google Scholar

Джонс О.А., Магуайр М.Л., Гриффин Дж.Л. (2008) Загрязнение окружающей среды и диабет: игнорируемая ассоциация. Ланцет 26 (37): 287–288

Артикул Google Scholar

Julkunen R, Janatuinen E, Kosma M, Mäki M (2012) сравнение диет с овсом и без овса у взрослых с глютеновой болезнью.Кишечник 50 (3): 332–335

Google Scholar

Кан С.Е., Халл Р.Л., Утцшнайдер К.М. (2016) Механизмы, связывающие ожирение с инсулинорезистентностью и диабетом 2 типа. Nature 444 (7121): 840–846

ADS Статья CAS Google Scholar

Karastergiou K, Smith SR, Greenberg AR, Fried SK (2012) Половые различия в жировой ткани человека — биология грушевидной формы. Биол Половые различия 3:13.https://doi.org/10.1186/2042-6410-3-13

Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

Karst H, Steiniger J, Noack R, Steglich H (2010) Термогенез, индуцированный диетой у человека: термические эффекты отдельных белков, углеводов и жиров в зависимости от их количества энергии. Ann Nutr Metab 28: 245–252

Статья Google Scholar

Келли Т.Ф., Капур Н.К., Либерман Д.З. (2009) Использование трийодтиронина в качестве вспомогательного средства при резистентном к лечению биполярном расстройстве II типа и биполярном расстройстве БДУ.J Affect Disord 116 (3): 222–226

CAS PubMed Статья Google Scholar

Kennedy A, Martinez K, Schmidt S, Mandrup S, LaPoint K, McIntosh M (2011) Механизмы действия конъюгированной линолевой кислоты против ожирения. J Nutr Biochem 21 (3): 171–179. https://doi.org/10.1016/j.jnutbio.2009.08.003

CAS Статья Google Scholar

Kershaw EE, Flier JS (2004) Жировая ткань как эндокринный орган.J Clin Endocrinol Metab 89 (6): 2548–2556

CAS PubMed Статья Google Scholar

Kersten S (2001) Механизмы нутритивной и гормональной регуляции липогенеза. EMBO Rep 2 (4): 282–286. https://doi.org/10.1093/embo-reports/kve071 PMC 1083868. PMID 11306547

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Kim BH, Lumor SE, Akoh CC (2014) Маргарины без транс-трансформера, приготовленные из структурированных липидов на основе масла канолы / пальмового стеарина / пальмоядрового масла.J Agric Food Chem 56 (17): 8195–8205

Статья CAS Google Scholar

King MW (2012) Структура и функции гормонов: гормон роста. Clin Endocrinol 65 (4): 413–422

Google Scholar

Киссиг М., Шапира С.Н., Сил П. (2016) Снимок: термогенез коричневого и бежевого жира. Ячейка 166 (1): 258–258.e1. https://doi.org/10.1016/j.cell.2016.06.038

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Кляйн А.В., Киат Х. (2015) Детокс-диеты для выведения токсинов и управления весом: критический обзор доказательств.J Hum Nutr Diet. 28 (6): 675–686. https://doi.org/10.1111/jhn.12286 Epub 2014 18 декабря

CAS Статья PubMed Google Scholar

Кляйн С., Петерс Дж., Холланд Б. Вулф Р. Влияние краткосрочной и долгосрочной бета-адренергической блокады на липолиз во время голодания у людей. Am J Physiol. 2006. 257: E65 – E73.

CAS Статья Google Scholar

La Merrill M, Emond C, Kim MJ, Antignac JP, Le Bizec B, Clément K, Birnbaum LS, Barouki R (2013) Токсикологическая функция жировой ткани: внимание к стойким органическим загрязнителям.Environ Health Perspect 121 (2): 162–169. https://doi.org/10.1289/ehp.1205485

CAS Статья PubMed Google Scholar

Лалчандани С.Г., Лей Л., Чжэн В., Суни М.М., Мур Б.М., Лиггетт С.Б., Миллер Д.Д., Феллер Д.Р. (2002) Димеры йохимбина, проявляющие селективность в отношении подтипа альфа-2С-адренорецептора человека. J Pharmacol Exp Ther. 303 (3): 979–84. https://doi.org/10.1124/jpet.102.039057

CAS PubMed Статья Google Scholar

Lambert JD, Sang S, Yang CS (2007) Возможные разногласия по поводу диетических полифенолов: преимущества против рисков.Chem Res Toxicol 20 (4): 583–585

CAS PubMed Статья Google Scholar

Lardy H, Partridge B, Kneer N, Wei Y (2007) Эргостероиды: индукция термогенных ферментов в печени крыс, получавших стероиды, полученные из дегидроэпиандростерона. Proc Natl Acad Sci 92 (14): 6617–6619

ADS Статья Google Scholar

Lenz TL, Hamilton WR, Ernst E (2013) Дополнительные продукты, используемые для похудания.J Am Pharm Assoc 44: 59–67

Статья Google Scholar

Леонард С.Т., Уоррел М.Э., Гурковская О.В., Льюис ПБ, Винсауэр П.Дж. (2014) Влияние 7-кетодегидроэпиандростерона на добровольное потребление этанола у самцов крыс. Алкоголь 45 (4): 349–354

Google Scholar

Леонард В.Р. (2008) Пища для размышлений: изменение режима питания было движущей силой в эволюции человека. Sci Am 287 (6): 106–115

Статья Google Scholar

Li T (2018) Овощи и фрукты: пищевая и лечебная ценность.США: CRC Press, стр. 1-2 ISBN 978-1-4200-6873-3

Lim SS, Vos-Theo F, Abraham D, Danaei G, Shibuya K, Adair-Rohani H et al (2012) Сравнительная оценка риска бремени болезней и травм, связанных с 67 факторами риска и кластерами факторов риска в 21 регионе, 1990–2010 годы: систематический анализ для исследования глобального бремени болезней. Ланцет 380 (9859): 2224–2260. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(12)61766-8

Артикул Google Scholar

Lyon CJ, Law RE, Hsueh WA (2003) Недавно открытые эндокринные функции белой жировой ткани: возможное значение при заболеваниях, связанных с ожирением.Эндокринол 144: 3765–3773

Статья CAS Google Scholar

Lyon M, Bland J, Jones DS (2016) Клинические подходы к детоксикации и биотрансформации. J Med Assoc 5: 34–45

Google Scholar

MacDonald E, Kobilka BK, Scheinin M (1997) Нацеливание на ген — наведение на функцию альфа-2-адренорецептора. Trends Pharmacol Sci 1997; 18 (6): 211–9. https: // doi.org / 10.1016 / s0165-6147 (97) 01063-8

CAS PubMed Статья Google Scholar

Мадгула В.Л., Авула Б., Павар Р.С. (2008) Метаболическая стабильность in vitro и транспорт P57 из Hoodia gordonii в кишечнике. Обзор клинических данных. Planta Medica 73 (4): 280

Google Scholar

Mallard SR, Howe AS, Houghton LA (2016) Статус витамина D и потеря веса: систематический обзор и метаанализ рандомизированных и нерандомизированных контролируемых исследований по снижению веса.Am J Clin Nutr 104: 1151–1159

CAS PubMed Статья Google Scholar

Manore M, Champaign IL, Thompson J (2011) Регулирование окисления жирных кислот в скелетных мышцах. Annual Rev Nutr 19: 463–484

Google Scholar

Manore MM (2015) Пищевые добавки для улучшения состава тела и снижения массы тела: где доказательства? Int J Sport Nutr Exerc Exerc Metab 22: 139–154

Статья Google Scholar

Mehta T, Smith DL Jr, Muhammad J, Casazza K (2014) Влияние смены веса на риск заболеваемости и смертности.Obes Rev 15 (11): 870–881. https://doi.org/10.1111/obr.12222

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Millan MJ, Mannoury CC, Chanrion B (2012) Роль серотонина в расстройствах пищевого поведения. J Pharm Exp Ther 340 (3): 750–764

CAS Статья Google Scholar

Montama JP, Coutre IL, Conner KS (2010) In: Berg JM (ed) Обнаружение жира, вкус, текстура и эффекты после переваривания пищи, 3-е изд.Springer, New York

Muckelbauer R, Sarganas G, Grüneis A, Müller-Nordhorn J (2013) Связь между потреблением воды и показателями массы тела: систематический обзор. Am J Clin Nutr 98 (2): 282–299. https://doi.org/10.3945/ajcn.112.055061

CAS Статья PubMed Google Scholar

Мудрый А.Н., Ю Н, Аукема Х.М. (2014) Пищевая ценность и польза зернобобовых для здоровья. Appl Physiol Nutr Metab 39 (11): 1197–1204.https://doi.org/10.1139/apnm-2013-0557.%20PMID%2025061763

CAS Статья PubMed Google Scholar

Муссолино М.Э., Инграм Д.Д., Бойрит С.Е. (2010) Потеря веса в результате максимальной массы тела и смертность: Связанный файл смертности третьего национального исследования здоровья и питания. Int J Obes 34: 1044–1050

Статья Google Scholar

Naber AH, Laflamme DP, Hannah SS (2015) Повышенный метаболизм белка способствует потере жира и снижает потерю безжировой массы тела во время похудания.Стажер J Appl Res Vet Med 3 (2): 62–79

Google Scholar

Naber AH, Wanten GJ, Boirit SE (2014) Клеточные и физиологические эффекты триглицеридов со средней длиной цепи. Mini Rev Med Chem 4 (8): 847–857

Google Scholar

Nagai M, Komiya H, Mori Y, Ohta T., Kasahara Y, Ikeda Y (2015) Оценка площади висцерального жира с помощью многочастотного биоэлектрического импеданса. Уход за диабетом 33 (5): 1077–1079.https://doi.org/10.2337/dc09-1099

Артикул Google Scholar

Nawrot P, Jordan S, Leonard S (2013) Влияние кофеина на здоровье человека. Пищевая добавка Contam 20 (1): 1–30

Статья Google Scholar

Naz A, Butt MS, Sultan MT, MMN Q, Niaz RS (2014) Ликопин арбуза и связанные с ним заявления о пользе для здоровья. EXCLI J 13: 650–660

PubMed PubMed Central Google Scholar

Nordqvist C, Gesta S, Tseng YH, Kahn CR (2012) Высокая распространенность коричневой жировой ткани у взрослых людей.J Clin Endocrinol Metab 96 (8): 2450–2455

Onakpoya I, Hunt K, Wider B, Ernst E (2014) Добавка пирувата для похудания: систематический обзор и метаанализ рандомизированных клинических испытаний. Crit Rev Food Sci Nutr 54: 17–23

CAS PubMed Статья Google Scholar

Onakpoya I, Posadzki P, Ernst E (2013) Добавки хрома при избыточном весе и ожирении: систематический обзор и метаанализ рандомизированных клинических испытаний.Obes Rev 14: 496–507

CAS PubMed Статья Google Scholar

Онакпоя И.Дж., Посадски П.П., Уотсон Л.К., Дэвис Л.А., Эрнст Э. (2012) Эффективность длительного приема конъюгированной линолевой кислоты (CLA) на композицию тела у людей с избыточным весом и ожирением: систематический обзор и метаанализ рандомизированных клинических исследований. Eur J Nutr 51 (2): 127–134. https://doi.org/10.1007/s00394-011-0253-9

CAS Статья PubMed Google Scholar

Парих С.Дж., Яновский Ю.А., Сибли С.Д. (2003) Потребление кальция и ожирение.Am J Clin Nutr 77: 281–287

CAS PubMed Статья Google Scholar

Park K (2010) Кетон малины увеличивает как липолиз, так и окисление жирных кислот в адипоцитах 3 T3-L1. Planta Medica 76 (15): 1654–1658

CAS PubMed Статья Google Scholar

Parra DK, Abete GS, Crujeiras AE, Goyenechea EB, Martinez JA (2008) Диета, богатая длинноцепочечными омега-3 жирными кислотами, модулирует чувство сытости у добровольцев с избыточным весом и ожирением во время потери веса.J Hum Nutr Diet 13 (6): 491–500

Google Scholar

Патак К., Соарес М.Дж., Калтон Е.К., Чжао Ю., Халлетт Дж. (2014) Статус массы тела витамина D: систематический обзор и метаанализ рандомизированных контролируемых испытаний. Obes Rev 15: 528–537

CAS PubMed Статья Google Scholar

Paul CB (2009) Питательные вещества, которые ускоряют потерю жира, и почему вы должны включать их в свой рацион, 18-е изд.McGraw-Hill, Бостон

Google Scholar

Пол Г.С., Мэри Л.С., Мортон ММП, Уолтер А.М., Родос Ф.А. MSL, Гагне М.С. (2011) Эффективность и безопасность эфедры и эфедрина для похудания и спортивных результатов: метаанализ. JAMA 289: 1537–1545

Google Scholar

Picco MF (2012) Очищение толстой кишки — хороший способ вывести токсины из организма? Colorectal Dis 11: 686 Mayo Clinic, Джексонвилл, Флорида

Google Scholar

Podder K, Kolge S, Benzman L, Mullin G, Cheskin L (2011) Нутрицевтические добавки для похудания: системный обзор.Nutr Clin Pract 26 (50): 539–552

Артикул Google Scholar

Pooyandjoo M, Nouhi M, Shab-Bidar S, Djafarian K, Olyaeemanesh A (2016) Влияние (L-) карнитина на потерю веса у взрослых: систематический обзор и метаанализ рандомизированных контролируемых исследований. Obes Rev 17: 970–976

CAS PubMed Статья Google Scholar

Портер С.А., Массаро Дж. М., Хоффманн У., Фокс С.С. (2009) Подкожная жировая ткань брюшной полости: защитное депо жира? Diab Care 32 (6): 1068–1075

Артикул Google Scholar

Prentice AM (2017) Макронутриенты как источники пищевой энергии.New England J Med 8 (7): 932–939. https://doi.org/10.1079/PHN2005779

Артикул Google Scholar

Раджамохан Т., Сандхья В.Г., Шнайдер П. (2016) Влияние кокосовой воды на липидный обмен у крыс, получавших холестерин. J Med Food 9 (3): 400–407

Google Scholar

Рамдат Д., Ренвик С., Дункан А.М. (2016) Роль зернобобовых в диетическом управлении диабетом.Can J Diabetes 40 (4): 355–363. https://doi.org/10.1016/j.jcjd.2016.05.015

Артикул PubMed Google Scholar

Рао Н., Спиллер Х.А., Ходжес Н.Л., Чаунтират Т., Казавант М.Дж., Камбодж А.К. и др. (2017) Центры токсикологического контроля США сообщили об увеличении воздействия пищевых добавок. J Med Toxicol 24 (4): 56–68

Google Scholar

Reiner S, Ambrosio M, Hoffmann C, Lohse MJ (2010) Дифференциальная передача сигналов эндогенных агонистов бета2-адренорецептора.J Biol Chem 285 (46): 36188–98. https://doi.org/10.1074/jbc.M110.175604

CAS PubMed Статья Google Scholar

Reuter SE, Evans AM (2012) Карнитин и ацилкарнитины: фармакокинетические, фармакологические и клинические аспекты. Clin Pharmacokinet 51: 553–572

CAS PubMed Статья Google Scholar

Родс Р.А., Таннер Г.А. (2003) Медицинская физиология, 2-е изд.Липпинкотт Уильямс и Уилкинс, Балтиморский ISBN 0-7817-1936-4. OCLC 50554808

Google Scholar

Rios-Hoyo A, Salmean G, Nyangono G (2016) Новые диетические добавки от ожирения: что мы знаем в настоящее время. Curr Obes Rep 5: 262–270

PubMed Статья Google Scholar

Робергс Р.А., Кетейян С.Дж. (2013) Основы физиологии упражнений: для фитнеса, работоспособности и здоровья, 2-е изд.McGraw-Hill Higher Education, Бостон

Google Scholar

Розенберг И.Х., Попкин Б.М., Д’Анси К.Э. (2010) Богатые водой продукты питания и здоровье. Nutr Rev 68 (8): 439–458. https://doi.org/10.1111/j.1753-4887.2010.00304.x

Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

Schmitt JA, Coutre IL, Wilkins SE (2015) Пищевые ингредиенты и когнитивные способности. Curr Opin Clin Nutr Metab Care 11: 706–710

Google Scholar

Шнайдер П., Сандхья В.Г., Раджамохан Т. (2016) Положительное влияние кокосовой воды на липидный обмен у крыс, получавших холестерин.J Med Food 9 (3): 400–407

Google Scholar

Швенк Т.Л., Харди М.Л., Костли К.Д. (2003) Когда пища становится лекарством: использование неанаболических пищевых добавок у спортсменов. Am J Sports Med 30 (6): 907

Статья Google Scholar

Serna-Saldivar SO (2015) Зерновые: лабораторные справочные материалы и руководство по процедурам. Технология консервирования пищевых продуктов. Соединенное Королевство: Тейлор и Фрэнсис, стр. 58 ISBN 978-1-4398-5565-2

Shekelle PG, Hardy ML, Morton SC, Maglione M, Mojica WA, Suttorp MJ, Rhodes SL, Jungvig L, Gagne J ( 2003b) Эффективность и безопасность эфедры и эфедрина для похудания и спортивных результатов.JAMA 289 (12): 1537–1545

CAS PubMed Google Scholar

Shekelle PG, Hardy ML, Morton SC, Maglione M, Mojica WA, Suttorp MJ et al (2003a) Эффективность и безопасность эфедры и эфедрина для похудания и спортивных результатов: метаанализ. JAMA 289: 1537–1545

CAS PubMed Google Scholar

Smith C, Krygsman A, Ogawa H (2014) Hoodia gordonii: есть или не есть.J Ethnopharmacol 155: 987–991

PubMed Статья Google Scholar

Смит И.К. (2016) Проблема с жиросжигающими таблетками. Эндокринол 55: 123–143

Google Scholar

Soerensen KV, Thorning TK, Astrup A, Kristensen M, Lorenzen JK (2014) Влияние молочного кальция из сыра и молока на фекальное выделение жира, липиды крови и аппетит у молодых мужчин. Am J Clin Nutr 99: 984–991

CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

Spadafranca A, Rinelli S, Riva A, Morazzoni P, Magni P, Bertoli S. et al (2013) Экстракт Phaseolus vulgaris влияет на гликометаболический контроль и контроль аппетита у здоровых людей.Br J Nutr 109: 1789–1795

CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

Stookey JD, Constant F, Popkin BM, Gardner CD (2008) Питьевая вода связана с потерей веса у женщин, придерживающихся диеты с избыточным весом, независимо от диеты и активности. Ожирение 16 (11): 2481–2488. https://doi.org/10.1038/oby.2008.409

Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

Stunkard AJ, Harris JR, Pederson NL, McClearn GE (2007) Генетические различия в метаболизме и регуляции жировой ткани.N Engl J Med 322: 1483–1487

Статья Google Scholar

Sulcová J, Hampl R, Hill M, Stárka L, Novácek A (2005) Отсроченные эффекты краткосрочного трансдермального применения 7-оксо-дегидроэпиандростерона на его метаболиты, некоторые гормональные стероиды и соответствующие протеогормоны у здоровых добровольцев мужского пола. Clin Chem Lab Med 43 (2): 221–227

PubMed Статья CAS PubMed Central Google Scholar

Терри Л. (2011) Полезные для здоровья свойства фруктов и овощей.Соединенное Королевство: CABI, pp 2–4 ISBN 978-1-84593-529-0

Tian H, Guo X, Wang X, He Z, Sun R, Ge S et al (2016) Добавки пиколината хрома для лечения избыточного веса или тучные взрослые. Кокрановская база данных Syst Rev.11: CD010063

Google Scholar

Trayhurn PY, Wood NS (2004) Adipokines: воспаление и плейотропная роль белого жира. J Clin Sci 92 (3): 347–355

CAS Google Scholar

Turcotte LP (2000) Потребление жирных кислот мышцами во время тренировки: возможный механизм.Exerc Sport Sci Rev 28 (1): 4–9

CAS. PubMed Google Scholar

Uckoo RM, Jayaprakasha GK, Nelson SD, Patil BS (2011) Быстрое одновременное определение аминов и органических кислот в цитрусовых с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии. Таланта 83: 948–954

CAS PubMed Статья Google Scholar

van Avesaat M, Troost FJ, Westerterp-Plantenga MS, Helyes Z, Le Roux CW, Dekker J et al (2016) Сытость, вызванная капсаицином, связана с желудочно-кишечным расстройством, но не с высвобождением гормонов сытости.Am J Clin Nutr 103: 305–313

PubMed Статья CAS Google Scholar

Vanhala M, Saltevo J, Soininen P, Kautiainen H, Kangas AJ, Ala-Korpela M, Mäntyselkä P (2012) Полиненасыщенные жирные кислоты омега-6 в сыворотке и метаболический синдром: продольное популяционное когортное исследование. Plant Biotechnol J 176 (3): 253–260

Google Scholar

Видж В.А., Джоши А.С. (2013) Влияние термогенеза, вызванного водой, на массу тела, индекс массы тела и состав тела у субъектов с избыточным весом.J Clin Diagn Res 7 (9): 1894–1896. https://doi.org/10.7860/JCDR/2013/5862.3344

Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

Вильярроэль П., Вильялобос Э., Рейес М., Сифуэнтес М. (2014) Кальций, ожирение и роль рецептора, чувствительного к кальцию. Nutr Rev 72: 627–637

PubMed Статья Google Scholar

Винсент Дж. Б., Сак Д. А., Роффман М., Финч М., Коморовски Дж. Р. (2003) Потенциальная ценность и токсичность пиколината хрома в качестве пищевой добавки, средства для похудания и средства для развития мышц.Sports Med 33 (3): 213–230

PubMed Статья Google Scholar

Виртанен К.А., Лиделл М.Э., Орава Дж., Хеглинд М., Вестергрен Р., Ниеми Т. и др. (2009) Функциональная коричневая жировая ткань у здоровых взрослых. N Engl J Med 360: 1518–1525

CAS PubMed Статья Google Scholar

Wardlaw DF, Gordon ME, Kessel MJ (2002) Perspectives in Nutrition, 5th edn.McGraw-Hill, Бостон

Google Scholar

Westerterp-Plantenga MS (2010) Катехины зеленого чая, кофеин и регулирование массы тела. Physiol Behav 100 (1): 42–46

CAS PubMed Статья Google Scholar

Westerterp-Plantenga MS, Lejeune MP, Kovacs EM (2005) Потеря веса тела и поддержание веса в связи с привычным потреблением кофеина и добавками зеленого чая.Obes Res 13 (7): 1195–1204

CAS PubMed Статья PubMed Central Google Scholar

Уилан А.М., Юргенс Т.М., Сзето В. (2010) Отчет о болезни. Эффективность худии для похудания: есть ли доказательства, подтверждающие утверждения об эффективности? J Clin Pharm Ther 35: 609–612

CAS PubMed Статья Google Scholar

Whingham LD, Watras CA, Scholler DA (2007) Эффективность конъюгированной линолевой кислоты для уменьшения жировой массы: метаанализ на людях.Am J Clin Nutr 85 (5): 1203–1200

Артикул Google Scholar

Whitehead A, Beck EJ, Tosh S, Wolever TM (2014) Эффекты снижения холестерина β-глюкана овса: метаанализ рандомизированных контролируемых исследований. Am J Clin Nutr 100 (6): 1413–1421. https://doi.org/10.3945/ajcn.114.086108

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Whiting S, Derbyshire EJ, Tiwari B (2014) Могут ли капсаициноиды помочь в управлении весом? Систематический обзор и метаанализ данных о потреблении энергии.Аппетит 73: 183–188

CAS PubMed Статья Google Scholar

Wilson JE, Thomas DR, Margaret MG, Morley RT (2011) Обзор снижения веса. Am J of Clin Nutr 83 (4): 735–743

Google Scholar

Wood JD, Enser M, Fisher AV, Nute GR, Sheard PR, Richard RD (2008) Отложение жира, состав жирных кислот и качество мяса: обзор. Meat Sci 78 (4): 343–358

CAS PubMed Статья Google Scholar

Yang L, Ying C, Zhen Y (2004) Стабильность конъюгированных изомеров линолевой кислоты в липидах яичного желтка во время жарки.Food Chem 86 (4): 531–535

CAS Статья Google Scholar

Яновски Дж. А., Парих С. Дж., Янофф Л. Б., Денкингер Б. И., Калис К. А., Рейнольдс Дж. К. и др. (2009) Влияние добавок кальция на массу тела и ожирение у взрослых с избыточным весом и ожирением: рандомизированное исследование. Ann Intern Med 15 (6): 821–829

Статья Google Scholar

Ylitalo R, Lehtinen S, Wuolijoki E, Ylitalo P, Lehtimaki T (2012) Свойства хитозана, снижающие уровень холестерина, и безопасность.Arzneimittelforschung 52 (1): 1–7

Google Scholar

Янг Л., Андерсон Дж., Роуч Дж. (2010) Обзор диеты с клетчаткой 35, 3-е изд. США: Энджи К. Мак Гроу-Хилл

Загорска М.Б., Кроткевски М., Ольшанецка М., Зураковски А. (2011) Эффект хитозана в комплексном лечении ожирения. Пол Меркуриуш Лек 13 (74): 129–132

Google Scholar

Зенк Дж. Л., Фрестедт Дж. Л., Кусковский М. А. (2012) HUM5007, новая комбинация термогенных соединений и 3-ацетил-7-оксо-дегидроэпиандростерон: каждый из них увеличивает скорость метаболизма в покое у взрослых с избыточным весом.J Nutr Biochem 18 (9): 629–634

Статья CAS Google Scholar

Большая жирная ложь — эксперт по питанию, который утверждает, что диеты действительно вызывают увеличение веса

Если бы они это сделали, диетологи могли бы попрощаться и повторить свой бизнес. Еще хуже: ограничение того, что вы едите, сделает вас толстым. Что еще хуже: диета йо-йо может вызвать депрессию, высокое кровяное давление и высокий уровень холестерина. У людей, сидящих на диете, вероятность умереть от сердечных заболеваний на 60 процентов выше, чем у людей, которые не морили себя голодом.

Успехи в похудании, о которых хвалили журналы для похудения, противоречат этому. Они рассказывают истории женщин (обычно это женщины), которые сильно похудели, соблюдая диету, ограничивающую потребление калорий. Как видно на фотографиях, эти женщины явно не растолстели, соблюдая такие режимы. Однако это только часть сложной головоломки, связанной с диетой, как объясняет Джеффри Кэннон в своей книге «Диета делает вас толстыми».Да, если вы потребляете меньше энергии, чем ваше тело сжигает за день, ваш вес снизится. Но Кэннон, советник по общественному здравоохранению и эксперт по питанию, смотрит на долгосрочную перспективу и говорит, что почти все люди, сидящие на диете, вынуждены прибегать к лекарствам, хирургическому вмешательству, дальнейшей диете или упражнениям, чтобы поддерживать первоначальную потерю веса.

Если название книги звонит в колокол, возможно, вы читали более раннюю одноименную книгу Кэннона, которую он написал 25 лет назад.Новые неопровержимые научные доказательства в поддержку утверждений в первой книге, глобальный кризис общественного здравоохранения, вызванный ожирением и сопутствующими ему заболеваниями, а также бурный рост диетической индустрии побудили Кэннон полностью переписать этот текст.

«Диета делает вас толстым» была новаторской четверть века назад, но ее идея, возможно, стала еще более актуальной сегодня. По мере того как люди становятся толще (в правительственном отчете от 2007 года прогнозировалось, что к 2050 году большинство взрослого населения Великобритании будет страдать ожирением), рынок средств для похудения растет.Индустрия диетического питания в США стоит 46 миллиардов долларов в год; в Европе он стоит 93 миллиарда евро. Очевидно, что наш аппетит к похудению не соответствует нашей способности избавляться от жира.

Почему мы не последовали совету Кэннона в первый раз? «Когда люди скептически относятся к диетам, они говорят, что диеты не работают», — объясняет он. «Но они всегда останавливаются перед тем, чтобы сказать, что диета делает вас толстыми, а это понятие имеет взрывоопасные последствия.Он указывает на научные исследования, которые иллюстрируют, как ловушка диеты приводит к увеличению веса. В обзоре UCLA 2007 года был сделан вывод: «Мы обнаружили, что большинство людей вернули весь вес, плюс еще больше … большинству из них было бы лучше не делать этого». вообще сяду на диету «.

Еще одно свидетельство было получено в результате эксперимента в закрытой экосистеме в Аризоне в начале девяностых.Восемь ученых согласились жить в искусственной биосфере два года. Оказавшись внутри, они обнаружили, что не могут вырастить достаточно еды, но согласились на диету в течение двух лет и продолжить эксперимент. Все они сбросили около 9 кг, прежде чем их вес стабилизировался. В течение шести месяцев после того, как они покинули биосферу, они снова набрали вес, и, что особенно важно, почти весь его был жир, а не мышечная ткань, с которой они начали. Диета делает вас не только толстыми, но и дряблыми.

«На протяжении всей истории люди эволюционировали и адаптировались, чтобы пережить голод и голод, — объясняет Кэннон. «Люди, которые выжили, были людьми, которые смогли выжить лучше всех, те, у кого были свои кладовые внутри себя в виде жира. Режим диеты не сработает, потому что вы тренируете свое тело, чтобы лучше пережить голод и голод».

Cannon прилагает все усилия, чтобы разбавить науку о диетах, из-за которых вы толстеете, и включает во всю книгу только одну таблицу, в которой рассматривается разница между энергией, сжигаемой нашим телом при разном весе и с разным составом тела — будь то худощавое (физически пригодное, но не обязательно легкие) или жирные (не обязательно тяжелые, но с высоким содержанием жира в мышечной ткани).Худощавая женщина, которая весит 70 кг (154 фунта), сжигает на 600 калорий больше в состоянии покоя в день, чем женщина весом 70 кг, у которой много жира.

Что же тогда является ответом на похудание, если диеты отсутствуют? Кэннон говорит, что есть много людей, которым нужно сильно похудеть, не разделяя неправильного представления о том, что худой — это здоровый человек, а толстые — нездоровые.Диета делает вас толстым предлагает семь золотых правил похудения, самое важное из которых — много упражняться и есть много свежих цельных продуктов. Он пишет по собственному опыту, поскольку сам в юном возрасте запрыгнул в тележку с диетами. Когда он понял, что диеты, которые он пробовал, оказались неэффективными, он начал доказывать, почему.

Вам действительно нужно подождать шесть или семь месяцев, чтобы увидеть положительные результаты, признает Кэннон, но следуйте его правилам, и вы вытащите свое тело из ловушки диеты.

Джеффри Кэннон «Диета делает вас толстым» опубликовано в Virgin Books

Диета делает вас толстыми — Alternet.org

Индустрия похудения сейчас раздувается так же быстро, как и наша талия, что кажется некоторым парадоксом. Если потребители, заботящиеся о своем теле, так счастливы покупать диетические продукты, почему мы сталкиваемся с кризисом ожирения? По правде говоря, никакая диета с контролем калорий не работает; Если бы это было так, диетологи могли бы попрощаться с повторным бизнесом. Хуже того: ограничение того, что вы едите, сделает вас толстым. Что еще хуже: диета йо-йо может вызвать депрессию, высокое кровяное давление и высокий уровень холестерина.У людей, сидящих на диете, вероятность умереть от сердечных заболеваний на 60 процентов выше, чем у людей, которые не морили себя голодом.

Успехи в похудании, о которых хвалили журналы для похудения, противоречат этому. Они рассказывают истории женщин (обычно это женщины), которые сильно похудели, соблюдая диету, ограничивающую потребление калорий. Как видно на фотографиях, эти женщины явно не растолстели, соблюдая такие режимы. Однако это только часть сложной головоломки, связанной с диетой, как объясняет Джеффри Кэннон в своей книге «Диета делает вас толстыми». Да, если вы потребляете меньше энергии, чем ваше тело сжигает за день, ваш вес снизится. Но Кэннон, советник по общественному здоровью и эксперт по питанию, смотрит на долгосрочную перспективу и говорит, что почти все люди, сидящие на диете, вынуждены прибегать к лекарствам, хирургическому вмешательству, дальнейшей диете или упражнениям, чтобы поддерживать первоначальную потерю веса.

Если название книги звонит в колокол, возможно, вы читали более раннюю одноименную книгу Кэннона, которую он написал 25 лет назад. Новые неопровержимые научные доказательства в поддержку утверждений в первой книге, глобальный кризис общественного здравоохранения, вызванный ожирением и сопутствующими ему заболеваниями, а также бурный рост диетической индустрии побудили Кэннон полностью переписать этот текст.

От диеты толстеют был революционным четверть века назад, но его послание, возможно, еще более актуально сегодня. По мере того как люди становятся толще (в правительственном отчете от 2007 года прогнозировалось, что к 2050 году большинство взрослого населения Великобритании будет страдать ожирением), рынок средств для похудения растет. Индустрия диетического питания в США стоит 46 миллиардов долларов в год; в Европе он стоит 93 миллиарда евро. Очевидно, что наш аппетит к похудению не соответствует нашей способности избавляться от жира.

Почему мы не последовали совету Кэннона с первого раза? «Когда люди скептически относятся к режимам питания, они говорят, что диеты не работают», — объясняет он. «Но они всегда останавливаются, чтобы сказать, что диета делает вас толстыми, а это концепция со взрывоопасными последствиями». Он указывает на научные исследования, которые показывают, как ловушка диеты приводит к увеличению веса. В обзоре, проведенном Калифорнийским университетом в Лос-Анджелесе в 2007 году, был сделан вывод: «Мы обнаружили, что большинство людей набрали весь вес и даже больше… Большинству из них было бы лучше вообще отказаться от диеты.»

Еще одно свидетельство было получено в результате эксперимента в закрытой экосистеме в Аризоне в начале 90-х. Восемь ученых согласились жить в искусственной биосфере в течение двух лет. Оказавшись внутри, они обнаружили, что не могут расти достаточно. еды, но согласились на диету в течение двух лет и продолжить эксперимент. Все они сбросили около 9 килограммов, прежде чем их вес стабилизировался. В течение шести месяцев после выхода из биосферы они снова набрали вес, и, что особенно важно, почти все это было жиром, а не мышечной тканью, с которой они начали.Диета делает вас не только толстыми, но и дряблыми.

«На протяжении всей истории люди эволюционировали и адаптировались, чтобы пережить голод и голод, — объясняет Кэннон. «Выжившие люди были людьми, которые были лучше всех способны, те, у кого были свои кладовые внутри себя в виде жира. Диета потерпит неудачу, потому что вы тренируете свое тело, чтобы лучше пережить голод и голодную смерть».

Cannon старается разбавить науку в Dieting Makes You Fat и включает в себя только одну таблицу во всей книге, в которой рассматривается разница между энергией, сжигаемой нашим телом при разном весе и с разным составом тела — будь то худощавое (худое) физически здоровый, но не обязательно легкий) или толстый (не обязательно тяжелый, но с высокой долей жира в мышечной ткани).Худощавая женщина, которая весит 70 килограммов (154 фунта), сжигает на 600 калорий больше в состоянии покоя в день, чем женщина с таким же весом, но с большим количеством жира.

Что же тогда является ответом на похудание, если диеты отсутствуют? Кэннон, не разделяя заблуждения о том, что худой по определению является здоровым человеком, а толстые тоже нездоровы, говорит, что есть много людей, которым нужно сильно похудеть. Он пишет по собственному опыту, поскольку сам в юном возрасте запрыгнул в тележку с диетами.Когда он понял, что диеты, которые он пробовал, оказались неэффективными, он начал доказывать, почему.

Диета делает вас толстыми предлагает семь золотых правил похудения, самое важное из которых — много тренироваться и есть много свежих цельных продуктов. Кэннон признает, что его подход занимает шесть или семь месяцев, прежде чем будут видны положительные результаты, но он настаивает на том, что это то, что нужно людям, чтобы вытащить свое тело из ловушки диеты.

7 правил покупки здорового йогурта

Йогурт в греческом и исландском стиле может быть идеальным быстрым и питательным продуктом, но только если вы покупаете правильные.На рынке есть много греческих йогуртов, и некоторые из них «испорчены» сахаром и искусственными ингредиентами. Ассортимент греческого йогурта на рынке варьируется от классного до мусорного! Настоящий греческий йогурт процеживается таким образом, что придает ему фирменную густую, богатую текстуру, а также гораздо более высокий уровень белка, чем в обычном йогурте. Чтобы избежать этого довольно трудоемкого и более дорогостоящего процесса, некоторые компании сокращают этот этап и завершают сгущение йогурта кукурузным крахмалом, пектином, камедью рожкового дерева и / или желатином, что приводит к меньшему количеству йогурта, полученному естественным путем с культурами и большим количеством загустителей.Ниже приведены несколько простых правил, которые помогут вам выбрать самый полезный для здоровья процеженный (греческий и исландский стиль) йогурт.

1) Ищите йогурт, содержащий «живые и активные культуры» . Некоторые компании подвергают йогурт термической обработке после культивирования с полезными бактериями, убивая как хорошие, так и вредные бактерии, чтобы продлить срок его хранения и уменьшить терпкость. Эти живые и активные бактерии способствуют здоровью кишечника, повышают иммунитет и могут даже стать ключом к тому, чтобы стать стройным и подтянутым. Для получения дополнительной информации прочтите статью «Ферментированные продукты после похудения».

2) Выбирайте йогурт с низким содержанием сахара . Обычный йогурт — лучший выбор, так как в нем нет сахара. Попробуйте добавить фрукты, фруктовый сироп, приготовленный из настоящих фруктов, таких как мой легкий черничный соус, подслащенное фруктовым соком (с низким содержанием сахара) варенье, сырой мед (не для младенцев) или чистый кленовый сироп (настоящий продукт) в простой процеженный йогурт. Избегайте йогуртов, в которых в качестве первого ингредиента указан сахар. Используя в качестве ориентира граммы сахара, указанные на этикетке, стандартный отдельный контейнер йогурта на 5,3 унции должен содержать не более 18 граммов сахара, а в идеале — менее 13 граммов. Имейте в виду, что от 6 до 9 граммов сахара на самом деле содержится в 6 унциях обычного обычного йогурта, а еще больше может быть получено из самих фруктов, но мы заинтересованы в снижении добавленного сахара сверх этого количества. Не забудьте обратить внимание на размер порции на этикетке при поиске количества сахара. Большая часть отдельных чашек весит 5,3 унции, но некоторые все еще остаются 6 унциями. В больших контейнерах йогурта на 35,3 унции в качестве размера порции используется 1 чашка, поэтому в каждой порции указано больше граммов сахара. Требуется меньше 25 граммов сахара на чашку, но лучше всего меньше 20 граммов сахара на чашку. Будем надеяться, что часть этого сахара поступает из настоящих фруктов.

3) Купите йогурт с настоящими фруктами. В йогурте должны быть настоящие фрукты, а не смесь сахара и пищевого красителя или овощного сока. Убедитесь, что вы видите настоящие фрукты в списке ингредиентов, в идеале до добавления сахара.

4) Избегайте искусственных заменителей сахара. Сорта с низким содержанием сахара часто полны искусственных подсластителей, особенно аспартама или сукралозы, которых мы не хотим. Если вы настаиваете на йогурте с искусственным подсластителем, по крайней мере, ешьте тот, который содержит монашеский фрукт, а не аспартам или сукралозу. Chobani выпустил Chobani Greek Yogurt Simple 100, в котором для подслащивания используются экстракт монахов и стевии, и я уверен, что и другие бренды последуют за ним.

5) Избегайте загустителей. Некоторые марки греческого йогурта сокращают расходы, добавляя загустители, такие как желатин, кукурузный крахмал, концентрат молочного белка, камеди и пектин, вместо того, чтобы процеживать йогурт, чтобы сделать его густым и кремообразным (что более чем вдвое увеличивает количество белка и снижает уровень лактозы).Этих самозванцев из греческого йогурта часто называют «греческим стилем». Настоящий греческий йогурт не содержит этих загустителей или, по крайней мере, в нем их ровно столько, чтобы сгущать добавленные фрукты, но все же содержит 12–16 г белка на порцию от 5,3 до 6 унций или 19–23 г белка на 1 чашку. Поэтому проверьте этикетку и постарайтесь выбрать йогурт с наибольшим количеством белка и наименьшим содержанием сахара

6) Будьте проще. Все, что нужно для приготовления йогурта, — это молоко и живые и активные бактерии, поэтому в простом йогурте больше ничего не должно быть.В ароматизированном греческом йогурте может быть больше ингредиентов, но список должен быть коротким и содержать слова, которые вы можете определить. Особенно избегайте добавления гидрогенизированного жира, искусственных подсластителей или искусственных красителей и ароматизаторов.

7) Не думайте, что обезжиренные продукты здоровы . Обезжиренный не всегда означает здоровый или низкокалорийный. Многие обезжиренные йогурты могут содержать много сахара. Выбирайте версию, в которой большая часть сладости содержится в настоящих фруктах. Более высокий процент жира в йогурте может быть не плохим парнем, как когда-то считалось, согласно некоторым исследованиям, в том числе исследованию Университета Брауна 2011 года, показавшему, что употребление молочных продуктов 3630 мужчинами не связано с риском сердечного приступа.Однако, поскольку содержание белка часто снижается, когда жир повышается, обезжиренный йогурт все же имеет свои преимущества. Не беспокойтесь о жирности йогурта и больше о том, сколько сахара в вашем йогурте!

Лучшие ароматизированные йогурты с 1 л. свежего сахара в сочетании с самым высоким содержанием белка: Те, у кого есть * — лучшие из лучших! (некоторые граммы сахара получают из молока и фруктов)

* Stonyfield Органический греческий 0% жирный ванильный йогурт: 5.3 унции содержат 14 г белка и 12 г сахара

Stonyfield Органический греческий 0% жирный малиновый йогурт: 5,3 унции содержит 13 г белка и 16 г сахара

Stonyfield Органический греческий йогурт с черникой 0% жирности: 5,3 унции содержит 12 г белка и 15 г сахара

* Siggi’s Icelandic Style Skyr Протертый ванильный или обезжиренный йогурт с апельсином и имбирем или гранат и маракуйя: 5,3 унции содержат 14 г белка и 9 г сахара

* Обезжиренный обезжиренный йогурт Siggi’s в исландском стиле Skyr с клубникой, черникой, персиком или смешанными ягодами: 5.3 унции содержат 14 г белка и 11 г сахара

Fage Total 0% обезжиренный греческий йогурт с черникой, малиной, вишней или клубникой: 5,3 унции содержат 13 г белка и 16 г сахара (фрукты идут сбоку, поэтому вы можете использовать меньше, а сахар еще меньше)

Греческий йогурт Чобани ваниль: 5,3 унции содержит 13 г белка и 13 г сахара

Греческий йогурт Chobani, смесь кокосов: 5,3 унции содержит 12 г белка и 13 г сахара

Греческий йогурт Чобани, лимонная смесь: 5.3 унции содержат 12 г белка и 15 г сахара

Греческий йогурт Chobani с фруктами на дне Черника, персик, ежевика, абрикос, красный апельсин, груша, гранат, клубника: 12 г белка и 15 г сахара

8) Бонусный совет: Разбавьте сахар, Увеличьте количество протеина. Добавьте простой греческий йогурт или даже творог (я предпочитаю ромашковый творог, поскольку он не содержит наполнителей) в подслащенные йогурты. Это по-прежнему дает вам возможность покупать подслащенный греческий йогурт, но позволяет легко разбавить сахар, одновременно повышая уровень белка в йогурте.Даже одна-две столовые ложки простого греческого йогурта, добавленные в небольшую емкость с подслащенными йогуртами, улучшают питательность йогурта. Дополнительный белок помогает вам дольше оставаться сытым, защищает вашу мышечную массу и замедляет всасывание сахара в кровоток, чтобы поддерживать уровень сахара в крови стабильным и выходить из режима образования жира. На самом деле, употребление определенного количества белка за завтраком может помочь вам уменьшить тягу и меньше есть во второй половине дня и вечером. Подробнее читайте в моей статье «Завтрак, который обострит наш мозг и похудит».

Калькулятор для разбавления / смешивания — Makimono

Вот небольшой инструмент для разбавления жидкостей, чтобы получить желаемый результат.

NB! Имейте в виду, что по определению 1 л воды = 1 кг воды, и что при приготовлении пищи в домашних условиях можно предположить, что это справедливо для многих других жидкостей, которые в основном состоят из воды, таких как молоко.

Примеры

Разбавляющий уксус

Допустим, вы хотите использовать для рецепта 150 мл уксуса с концентрацией 10% (кислоты).Но у вас есть только уксус крепостью 30%, и его нужно разбавить водой (крепость 0%). Тогда в форме выше вы можете заполнить номер

Желаемая общая сумма: 150
Конечная концентрация: 10
Первое, что нужно перемешать — Концентрация: 30
Другая вещь, которую вы хотите смешать — Концентрация: 0

После нажатия кнопки Определить необходимое количество форма будет обновлена, и в поле Сумма для 30% -ного уксуса вы увидите, что вам нужно 50 мл, а вам нужно добавить 100 мл 0% воды.

Использование масла и молока для получения жидкости с таким же процентным содержанием жира, что и сливки

Другой пример: вам не хватает сливок для рецепта, но есть масло. Вы знаете, что вам нужно 250 граммов сливок и что они должны быть жирностью 20%. Допустим, у вас есть масло на 82% жирности, и у вас также есть молоко 3,5% жирности. Затем в калькуляторе выше вы можете ввести

Желаемая общая сумма: 250
Конечная концентрация: 20
Первое, что нужно перемешать — Концентрация: 3.5
Другая вещь, которую вы хотите смешать — Концентрация: 82

После нажатия кнопки Определить необходимое количество , форма будет обновлена, и в поле Сумма для молока 3,5% вы увидите, что вам нужно 197,45 грамма, а вам нужно добавить 52,55 грамма молока. масло 82%.

Примечания

Важные сведения об утилите:

Единицы измерения количества и концентрации могут быть любыми, но они все равно работают одинаково.То есть не имеет значения, в граммах на литр или в процентах, или в граммах, литрах и т. Д.
Суммы должны быть согласованного типа. Если ваше общее желаемое количество указано в миллилитрах, подаваемое количество должно быть в миллилитрах.
Концентрации должны быть постоянного типа. Если вы используете процент для концентрации, все поля концентрации должны быть в процентах.
Инструмент округляет суммы до двух десятичных знаков.

Математика

Вот обзор предположений, лежащих в основе инструмента, и того, как он работает. Он основан на следующем предположении:

Сумма 1 * Концентрация 1 + Сумма 2 * Концентрация 2 = Целевая сумма * Конечная концентрация

Или, для краткости,

a1 * c1 + a2 * c2 = at * cf

Используя свойство, которое мы ожидаем, что суммы будут складываться, то есть a1 + a2 = at , мы можем найти суммы, которые нам нужно сложить, чтобы получить окончательный результат.Мы должны знать концентрации, и когда мы это узнаем, мы сможем вычислить их следующим образом:

a1 * c1 + a2 * c2 = at * cf
a1 * c1 + (at — a1) * c2 = at * cf
a1 * c1 — a1 * c2 + at * c2 = at * cf
a1 * (c1 — c2) = at * (cf — c2)
a1 = at * (cf — c2) / (c1 — c2)

При ближайшем рассмотрении мы видим, что последнее выражение зависит только от конечного количества, которое мы хотим оставить, и от концентраций.Следовательно, для случаев, когда мы полагаемся на порядок или если мы хотим вычислить суммы одновременно, мы можем аналогичным образом выразить другую сумму как a2 = at * (cf — c1) / (c2 — c1) .

Я пробовал Hypercuts Fat Burner Natural [Идентификатор таблетки]

Hypercuts Fat Burner Natural

Последние Hypercuts Fat Burner Natural Shop Интернет-отель Collinetta.

Игрок построения будет временно мобилизовать построение в ответ на движение противника, и никогда не останется прежним, позволяя противнику выйти из ворот.

Пот на его лице и теле становится все больше и больше, и он чувствует, что рубашка на его теле пропиталась потом.

Хотя что-то произошло на втором этаже, человек в черном, который стоял в коридоре на третьем этаже, оставался неподвижным.

Как только он вошел во двор, великий сжигатель жира Natural Natural Guardian вздохнул с облегчением, потому что с его уровнем совершенствования он мог естественным образом почувствовать существование секретного свистка Natural Shop для сжигателя жира Hypercuts.

Он и Пан Юн Ук натурал огляделись, гадая, что делать дальше, но когда они услышали гиперкруты сжигателя жира Natural Healthy pop, рука вырвалась из гиперкадров сжигателя жира Natural Healthy, деревянная простая и легкая дверь Natural.

Ма Чаосин и трое других ветеранов спрятали жиросжигатель Natural Hotel Collinetta в слепых зонах во дворе, чтобы не дать убийце сбежать.

Хан может легко изменить свою внешность, и, похоже, для Си гиперрезов, сжигателя жира Natural Shop Tong, не проблема, чтобы изменить свою внешность.

Навыки, которым учил старый король вначале, и некоторые вещи, которые он видел, кажутся довольно большими, но, в конце концов, есть вещи, которых он не испытал.

Он сказал, что яростно гиперкарт жиросжигатель Natural Shop Вы можете убрать свои гиперкарты жиросжигатель Natural Healthy прямо сейчас, а я один месяц быстро сделаю покупки, я посмотрю, что вы можете вытащить Увидев жиросжигатель Hypercuts 2019 года Natural epic bet, старик покачал головой, но теперь он ничего не может сказать.

Сорок тысяч Вор гиперкарт жиросжигатель Natural Natural брови неодобрительно сказал Тяньши хороший гиперкарт жиросжигатель Natural Natural Пилюлька удачи — одна пилюля, моя — тринадцать пилюль.

Увидев, что Чжан Юй закрыла гиперкарт жиросжигателя Natural Natural Uk естественным образом ее глаза и долго молчали, она гиперкарт жиросжигателя Natural Healthy не могла не удивляться, и она немного нервничала.

Выгнав из зала заседаний, Ян Ин схватил Чжан Ю, которого судят в несколько шагов, и прошептал Сяо Юй, что ты имеешь в виду?

Люди, которые едут на остров, не могут брать с собой еды, даже если они захотят, мы узнаем, и даже если я принесу еды, сколько я могу принести Великий Защитник спокойно сказал. Что вы думаете о Как сказал Великий Защитник, у Чжан Юй действительно была идея.

Услышав слова Чжан Юя, У Дунго, очевидно, остановился в руке и больше не пытался тянуть бронзовую дверь.

С моим 20-летним опытом выращивания собак, это определенно онлайн-планы диеты Натуральная самая чистая немецкая овчарка в мире Она также видела Бао Цзяиня, БенШи была так взволнована, что хотела позвонить ей напрямую, поэтому быстро сменила титул.

В конце концов, Ю истинная личность не была представлена ей, и гиперкрутом сжигателя жира Natural Natural никто бы не подумал, что молодой человек, который выглядел бы обычным, будет председателем Wudang Group.

Yuan Zhenren Не мог не усмехнуться и сказал: Daoyou Lu в беде, и он привел сюда так много людей, но результат неожиданно хороший. Это правда, что она и Лу Чжэньрен воюют открыто и тайно, но когда дело доходит до основных проблем, это не должно быть расплывчатым, и полезный идентификатор таблетки гиперкритует сжигатель жира. подчеркнул.

Но подумайте об этом, этот гиперкарт жиросжигатель Natural. Здоровый человек — сюжет тоже должен быть отличным, иначе он бы никогда не стал делать такие вещи. Hypercuts сжигатель жира Natural Hotel Collinetta Здесь Чжан Юй. После паузы он продолжил. Во-первых, дела студентов Университета Чжэньхай привлекли внимание дворца Баймэй.

Сейчас Helpful Natural Forskolin Zhang Yu Не мог не задаться вопросом, что же делать. Очевидно, уйти сейчас невозможно.

Хан вообще использует тебя. Ты не хочешь больше ничего для него делать, все еще слишком поздно, чтобы останавливаться, сейчас Чжан Юй чуть не закричал.

Но большой управляющий черного рынка, как может быть меньше гиперкадров сжигатель жира Natural Hotel Collinetta мощное магическое оружие, которое он видел, Тан Qixuan лицо сразу стало очень спокойным.

Позже я узнал, что с тех пор, как Да Ли Цзюнао стал заместителем главы района, эффективность гиперкадров 2019 года сжигателя жира Natural в офисах на всех уровнях ниже повысилась. to hypercuts сжигатель жира Natural Natural обычные обеды, не говоря уже о получении подарков.

С плачущей палкой, черной цепью и гиперкрутами жиросжигателя Natural Hotel Collinetta черные гиперкары жиросжигателя Natural Shop жетон, гиперкарт жиросжигателя Natural Natural Чжан Юй мог только чувствовать сильное зло на нем и не знал, как его использовать .

Но когда они повернулись к верхним ступеням и прошли немного расстояния, они услышали звук дождя на улице.

Кажется, что hypercuts сжигатель жира Natural , что все глаза обращают внимание на гиперкарты сжигателя жира Natural Shop тела хранителя в этот момент, и они очень ждут этого, надеясь, что хранитель может спасти их жизни.

Nanwu Amitabha Молодое население Medicalcenter объявило о сжигании жира с гиперкрутами Natural Healthy Buddha в 2019 году, а небольшая башня направилась прямо к сжигателю жира Natural Healthy Bai Wuchang с гиперкрутами и разбила его.

Chuxue был схвачен за руку, но он продолжал идти, продолжая играть на флейте во рту, и продолжал двигаться вперед.

Чжан Иньлин мгновенно покраснела, ее сердце бешено колотилось, гиперкарт жиросжигателя Natural Healthy, и она почти Helpful Natural Forskolin выпрыгнула из ее горла.

В такой ситуации его дух неизбежно будет ослаблен, и его дети неизбежно пострадают.

В конце концов, перед тем, как принять любую компанию, нельзя пренебрегать счетами, и их нужно сначала проверить.

Услышав, что сказала младшая сестра, Юань Чжэньрень гиперкритует сжигатель жира Natural Natural кивнул и сказал: Этот парень действительно не боится испугаться. Это я, президент Юань, где вы сейчас? Голос директора Цинь из Бюро религиозной администрации раздался по телефону.

О Ли Цзюнь на мгновение опешил и произнес в замешательстве Гиперкрутки сжигатель жира Natural Healthy Police Полицейский в отставке умер, Бесплатные гиперрезы сжигатель жира Natural Doctor Рекомендовано , но это привлекло внимание инспекции по добросовестности Директор Линь хотел рассказать Ли Цзюнао о конкретной ситуации, но, как только он произнес это слово, он прямо вошел в комнату, где присутствовали гиперрезы, сжигатель жира Natural Natural, и Ли Цзюнао. Слева гиперкарты, сжигатель жира Natural Shop и справа, и два журнальных столика посередине.

Купить лучшие таблетки магазин 2515 Торговля Чжан Юй посмотрел на воров и подумал об этом, он подумал, что не может ждать.

Чжан Юй жестом показал своим ученикам, чтобы они продолжали практиковать, и с улыбкой подошел к Чжан Иньлиню.

Когда заместитель директора повышается до директора Первоначальный директор также был Чжу Цин, согласно которому муниципальное лесное хозяйство одобрило назначение. Чжан Яо был шокирован еще больше, потому что единственный «полезный идентификатор таблетки» — гиперреакция на сжигатель жира. Натуральным человеком, который бросился стрелять по столу, был Ли Цзюнао, глава района.

Услышав голос, ведущий учитель, который гиперпреобразовал сжигатель жира Natural Healthy, сидел в старом зале монархов, немедленно привел группу подчиненных из зала детей bmi Natural.

Лицо великого защитника было очень спокойным, но он мирно спросил, Все ли артефакты тех людей в комнате 8 Купить лучшие таблетки в магазине 2573 неразумно Пойдем и посмотрим Они быстро сложили их и сказали одну за другой. Все коробки там, и волшебные предметы внутри тоже.

Но мастер внезапно предложил, давайте научим учеников Health Care Hypercuts Fat Burner Natural драться, и тот, кто победит, в конце концов, отдаст это облачение Health Care Hypercuts Fat Burner Natural кому-нибудь. В борьбе друг с другом, блокаторы углеводов для похудения Shop I сначала показали слабость гиперкадров, сжигатель жира Natural , а затем победили его с помощью зеркала сплетен.

Другие люди также гиперклассируют сжигатель жира Natural Natural знают эту истину, большой парень — это глаза, которые все сосредоточены на этом большом экране, внимательно наблюдая.

Он немедленно достал телефон, набрал номер телефона ученика из Уданчжая и попросил ученика принять лекарство в соответствии с рецептом и быстро отправить его в университет Чжэньхай.

Я знаю, мне очень жаль. В то время я просто подумал, что этого будет достаточно, чтобы дать вам программу обучения в аспирантуре.

Важная роль miR-196a в коричневом адипогенезе клеток-предшественников белого жира

Abstract

Недавнее открытие функциональных коричневых адипоцитов у взрослых людей проливает свет на потенциал этих клеток в лечении ожирения и связанных с ним заболеваний.Известно, что у грызунов коричневые адипоцитоподобные клетки рекрутируются в белую жировую ткань (WAT) в результате воздействия холода или β-адренергической стимуляции, но молекулярный механизм, лежащий в основе этого явления, полностью не изучен. Здесь мы показываем, что индуцибельный коричневый адипогенез опосредуется микроРНК miR-196a. Мы обнаружили, что miR-196a подавляет экспрессию гена белого жира Hoxc8 посттранскрипционно во время коричневого адипогенеза клеток-предшественников белого жира. У мышей miR-196a индуцируется в клетках-предшественниках WAT после воздействия холода или β-адренергической стимуляции.Жир-специфическая форсированная экспрессия miR-196a у мышей вызывает рекрутирование коричневых адипоцитоподобных клеток в WAT. Трансгенные мыши miR-196a демонстрируют повышенный расход энергии и устойчивость к ожирению, что указывает на то, что индуцированные коричневые адипоцитоподобные клетки метаболически функциональны. Механически Hoxc8 нацеливается и репрессирует C / EBPβ , главный переключатель генной программы бурого жира, в сотрудничестве с гистондеацетилазой 3 (HDAC3) через регуляторную последовательность C / EBPβ 3 ‘.Таким образом, miR-196a индуцирует функциональные коричневые адипоциты в WAT посредством подавления Hoxc8 , который функционирует как привратник индуцибельного коричневого адипогенеза. Сигнальный путь miR-196a- Hoxc8 — C / EBPβ может быть терапевтической мишенью для индукции коричневого адипогенеза для борьбы с ожирением и диабетом 2 типа.

Сведения об авторе

Ожирение вызывается накоплением избыточной энергии в жировой ткани, называемой белой жировой тканью (WAT), и может привести к серьезным проблемам со здоровьем, таким как диабет.Млекопитающие также обладают коричневой жировой тканью (BAT), которая служит для выработки тепла тела для стабилизации температуры тела при воздействии холода и в изобилии присутствует у животных, находящихся в спячке, и новорожденных людей. При выполнении своей функции BAT потребляет энергию, тем самым уменьшая накопление жира WAT. Недавние исследования показали, что воздействие холода стимулирует частичное превращение WAT в BAT у мышей, и, учитывая, что взрослые люди имеют ограниченное количество BAT, такое преобразование может предоставить новый метод борьбы с ожирением.Здесь мы анализируем молекулярный механизм этого преобразования с использованием генетически измененных мышей и клеток, выделенных из жировой ткани человека. Мы обнаружили, что уровни экспрессии микроРНК, miR-196a, положительно коррелируют с превращением WAT в BAT в условиях воздействия холода. Мы показываем, что принудительная экспрессия miR-196a в жировой ткани мыши увеличивает содержание BAT и расход энергии, тем самым делая животных устойчивыми к ожирению и диабету. Механически мы наблюдаем, что miR-196a действует путем ингибирования экспрессии гомеотического гена Hoxc8, репрессора коричневого адипогенеза.Эти результаты представляют терапевтическую возможность использования микроРНК для борьбы с ожирением и связанными с ним заболеваниями у людей.

Образец цитирования: Mori M, Nakagami H, Rodriguez-Araujo G, Nimura K, Kaneda Y (2012) Существенная роль miR-196a в коричневом адипогенезе клеток-предшественников белого жира. PLoS Biol 10 (4): e1001314. https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314

Академический редактор: Антонио Дж. Видаль-Пуч, Кембриджский университет, Великобритания

Поступила: 13 декабря 2011 г .; Принято: 16 марта 2012 г .; Опубликовано: 24 апреля 2012 г.

Авторские права: © 2012 Mori et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Работа поддержана грантами Министерства образования, культуры, спорта, науки и технологий; Японская кардиологическая ассоциация; и Фонд сердца Мията. М.М. поддерживается исследовательским сообществом Японского общества содействия развитию науки (JSPS) для молодых ученых.Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Сокращения: АСО, г. антисмысловой олигонуклеотид; ЛЕТУЧАЯ МЫШЬ, коричневая жировая ткань; epiWAT, эпидидимальная жировая ткань; iBAT, межлопаточная коричневая жировая ткань; ingWAT, паховая белая жировая ткань; SVF, стромальная сосудистая фракция; WAT, белая жировая ткань

Введение

Коричневая жировая ткань (BAT) сжигает избыточную энергию за счет разобщения митохондриальной энергии, опосредованного разобщающим белком-1 (Ucp1, также известным как термогенин) в неподвижном термогенезе [1].Недавние открытия метаболически активных BAT у взрослых людей [2] — [6] выделили BAT как новую терапевтическую мишень для лечения ожирения и связанных с ним заболеваний, таких как сахарный диабет 2 типа [7]. Активность BAT обратно коррелирует с индексом массы тела у людей [3] — [4], что подразумевает значительную роль BAT в развитии ожирения. Важно отметить, что коричневые адипоцитоподобные клетки в белой жировой ткани (WAT) могут генерироваться воздействием холода или β3-адренергической стимуляцией у грызунов [8] — [9], а активность BAT может быть увеличена воздействием холода или β3- адренергическая стимуляция у человека [2].Молекулярные механизмы, лежащие в основе индуцибельного коричневого адипогенеза, полностью не выяснены.

Паттерны экспрессии гомеобоксов семейства Hox (Hox-гены) характерно различаются между BAT и WAT [10] — [12], что подразумевает значительную роль Hox-генов в определении двух типов жира. Но его значение до конца не изучено. Hox гены являются представителями онтогенетических генов и придают переднезаднюю позиционную идентичность во время эмбриогенеза.Некоторые Hox гены играют роль в системах дифференцировки, таких как гематопоэз [13], миогенез [14] и кардиогенез [15], но относительно меньше известно об их роли в адипогенезе. Среди дифференциально экспрессируемых Hox-генов Hoxc8 более высоко экспрессируется в WAT, чем в BAT, и классифицируется как ген белого жира [11], [16]. Эти наблюдения предполагают, что Hoxc8 может иметь неизвестную роль в определении двух типов жира.

микроРНК (miRNAs) являются важными регуляторами генных сетей, лежащих в основе разнообразных биологических явлений [17].miRNAs — это небольшие некодирующие РНК, которые соединяются в пары со специфическими мРНК и подавляют посттранскрипционную экспрессию генов [18]. miRNAs составляют важный регуляторный слой на уровне транскрипционной сети [19]. Благодаря своей регулирующей способности miRNAs влияют на вывод сигнальных сетей посредством тонкой настройки или переключения уровней вывода [19] и способствуют или перенаправляют динамический поток в генетических схемах и влияют на дифференцировку [20]. Роль miRNAs в индуцируемом коричневом адипогенезе при WAT не совсем понятна.

Здесь мы показываем, что одиночная miRNA miR-196a способна рекрутировать метаболически функциональные коричневые адипоциты в WAT у мышей. Экспрессия miR-196a индуцируется в клетках-предшественниках WAT у мышей, подвергшихся холодовой или β3-адренергической стимуляции. Индукция miR-196a необходима для экспрессии гена коричневого жира и достаточна для образования метаболически функциональных коричневых адипоцитоподобных клеток в WAT у мышей. Целевым геном miR-196a является ген белого жира Hoxc8 , который непосредственно репрессирует экспрессию C / EBPβ , главного регулятора коричневого адипогенеза.

Результаты

HOXC8 Репрессирует гены коричневого жира и подавляется во время коричневого адипогенеза клеток-предшественников WAT человека

Недавние сообщения показали, что происходящие из WAT клетки-предшественники претерпевают коричневый адипогенез in vitro как у мышей [16], [21], так и у людей [16], [22]. Соответственно, клетки-предшественники человеческого жира, полученные из подкожного подкожного WAT (в дальнейшем, клетки-предшественники WAT), проявляли повышенную экспрессию гена коричневого жира после дифференцировки (фиг. S1A и S1B). HOXC8 классифицируется как ген белого жира [16], и анализ РНК-seq показал, что HOXC8 наиболее высоко экспрессируется среди сгруппированных генов HOX в человеческих клетках-предшественниках WAT (рис. 1A и 1B). Мы заметили, что HOXC8 подавляется в дифференцированных адипоцитах (рис. 2A и 2B). Напротив, экспрессия HOXC6 не изменилась после дифференцировки (Рисунок S1C) и не была особенно высокой в WAT (Рисунок S1D), хотя HOXC6 расположен рядом с HOXC8 в кластере HOXC и был вторым наиболее высоко экспрессируемым геном ( Рисунок 1A и 1B).Эти результаты предполагают существование специфического механизма регуляции экспрессии HOXC8. Подавление HOXC8 наблюдалось на уровне белка (рис. 2С), но не на уровне мРНК (рис. 2D). Эти результаты предполагают, что HOXC8 может регулироваться посттранскрипционно. Трансдукция HOXC8 в человеческие клетки-предшественники WAT подавляла гены бурого жира, включая C / EBPβ [23], UCP1 [24] и ADIPSIN (также известный как CFD ) (Рисунок 2E ) [23].Напротив, HOXC8 не подавлял гены белого жира, включая лептин [11], CD24 [25], HMGA2 [26] и ADIPOQ (также называемый адипонектином ) (рис. 2E ). Эти результаты предполагают, что HOXC8 может регулировать гены коричневого жира и что HOXC8 может быть важным регулятором коричневого адипогенеза клеток-предшественников WAT.

Рисунок 1. HOXC8 наиболее высоко экспрессируется среди кластерных генов HOX в человеческих клетках-предшественниках WAT.

(A) Результаты последовательности РНК-специфической цепи, показывающие уровни экспрессии кластерных генов HOX в недифференцированных клетках-предшественниках белого жира человека (WAT). Показаны результаты с кластерами HOXA, HOXB, HOXC и HOXD. Положение генов RefSeq показано ниже. (B) Уровни экспрессии сгруппированных Hox-генов из двух биологических повторов. FPKM, количество фрагментов на килобазу экзона на миллион картированных фрагментов.

https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.g001

Рис. 2. HOXC8 репрессирует гены коричневого жира и подавляется во время коричневого адипогенеза человеческих клеток-предшественников WAT.

(A) Иммунофлуоресцентный анализ HOXC8 в человеческих клетках-предшественниках WAT. Стрелки указывают на дифференцированные адипоциты с множественными пузырьками. Клетки контрастировали с помощью CellTracker и DAPI. Масштабные линейки показывают 30 мкм. (B) Процент клеток, экспрессирующих HOXC8, среди недифференцированных клеток (Undiff) и дифференцированных клеток (Diff).(C) Иммуноблоты для HOXC8 в человеческих клетках-предшественниках WAT, обработанных адипогенной индукционной средой (индукция) или оставленных без обработки. β-актин использовали в качестве контроля нагрузки. (D) qRT-PCR уровней экспрессии мРНК HOXC8 и в человеческих клетках-предшественниках WAT, оставленных необработанными или индуцированных для дифференцировки. Данные были нормализованы к 18S . (E) Анализ qRT-PCR генов в человеческих клетках-предшественниках WAT, трансдуцированных Hoxc8 или контрольным вектором и индуцированных для дифференцировки.Результаты нормализованы к 18S . Все данные представлены как средние значения ± стандартная ошибка среднего; * p <0,05 по сравнению с необработанными. n.s., не имеет значения.

https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.g002

Hoxc8 подавляется во время коричневого адипогенеза in vivo

Чтобы распространить наши результаты in vitro на in vivo, мы перешли к модели коричневого адипогенеза на мышах. У мышей экспрессия Hoxc8 была выше в WAT, чем в BAT и других тканях (Рисунок S2).Стромальная сосудистая фракция (SVF) жировых депо содержит жировые клетки-предшественники (в дальнейшем — SVF-клетки). Экспрессия Hoxc8 подавлялась после того, как клетки SVF были индуцированы для прохождения коричневого адипогенеза (фиг. 3A и 3B) и экспрессии Ucp1 (фиг. 3C), Pgc-1α и C / EBPβ (фигура 3D). У мышей коричневый адипогенез может быть индуцирован в WAT путем введения β3-адренергического агониста, CL-316,243, или путем помещения мышей в холодную среду. После введения CL-316,243 экспрессия Hoxc8 заметно снижалась в паховой WAT (ingWAT) (рис. 3E).Подавление Hoxc8 было относительно умеренным в придатковой WAT (epiWAT) и межлопаточной BAT (iBAT), чем в ingWAT (Figure 3E). Чтобы очертить изменения экспрессии Hoxc8 во время белого и коричневого адипогенеза, уровни экспрессии Hoxc8 сравнивали между фракцией клеток-предшественников (SVF) и фракцией ткани, в основном состоящей из зрелых адипоцитов. В результате экспрессия Hoxc8 немного увеличивается в WAT, обработанном физиологическим раствором, чем в SVF, и подавляется в обработанном CL-316,243 жире, который подвергся коричневому адипогенезу, что указывает на то, что Hoxc8 подавляется специфически во время коричневого адипогенеза, но не во время белый адипогенез (рис. 3F).Таким образом, подавление Hoxc8 наблюдается во время коричневого адипогенеза как in vitro, так и in vivo.

Рисунок 3. Hoxc8 подавляется во время коричневого адипогенеза in vivo.

(A) Иммунофлуоресцентный анализ Hoxc8 в клетках SVF мыши, полученных из паховой WAT. Клетки не подвергали обработке (недифференцированные) или индуцировали дифференцировку (адипогенная индукция). Липидные капли и ядра контрастировали с помощью Bodipy и DAPI соответственно. Шкала показывает 30 мкм.(B) Иммуноблоты Hoxc8 в мышиных SVF-клетках, оставленных необработанными или индуцированных для дифференцировки. β-актин служил контролем нагрузки. (C) Вверху, экспрессия UCP1 в дифференцированных клетках SVF мыши. Шкала показывает 30 мкм. Ниже, кратное увеличение уровней экспрессии мРНК Ucp1 и Ucp2 в клетках WAT-SVF мыши, индуцированных для дифференцировки. Результаты были нормализованы до β-актина . (D) Экспрессия Pgc-1α и C / EBPβ , индуцированная во время дифференцировки мышиных клеток SVF.Результаты были нормализованы до β-актина . Данные представлены в виде средних значений ± стандартная ошибка среднего; * p <0,05. (E) Вестерн-блоттинг в различных жировых депо от мышей, получавших или не получавших CL-316,243, агониста β3-адренергических рецепторов. ingWAT, epiWAT и iBAT обозначают паховую WAT, эпидидимальную WAT и межлопаточную BAT соответственно. (F) Вестерн-блот-анализ Hoxc8 в клетках SVF и ingWAT мышей, обработанных CL-316,243 (CL) или физиологическим раствором.

https://doi.org/10.1371 / journal.pbio.1001314.g003

miR-196a Регулирует экспрессию Hoxc8 в коричневом адипогенезе клеток-предшественников WAT

Далее мы попытались идентифицировать механизм, лежащий в основе подавления Hoxc8 во время коричневого адипогенеза. Посттранскрипционная регуляция Hoxc8 была предложена экспериментами in vitro. Характерно, что ряд Hox генов регулируется miRNAs [14], [27] — [29], а экспрессия Hoxc8 может подавляться эволюционно консервативной miR-196a посредством ингибирования трансляции во время развития позвоночных [28].Есть два гена, кодирующие miR-196a (miR-196a-1 и miR-196a-2), расположенные в кластерах генов Hox [28]. Основываясь на гипотезе, что Hoxc8 может регулироваться с помощью miR-196a, мы исследовали экспрессию miR-196a во время коричневого адипогенеза у мышей. Мы обнаружили, что экспрессия miR-196a индуцировалась в депо WAT мышей, подвергшихся воздействию холода или β3-адренергической стимуляции (рис. 4A). Более конкретно, miR-196a в большей степени индуцировалась в клетках SVF (фиг. 4B), чем в зрелых адипоцитах (фиг. S3).Таким образом, экспрессия miR-196a индуцируется в клетках SVF у мышей, подвергшихся β3-адренергической стимуляции или воздействию холода. Анализ гибридизации in situ miR-196a показал индукцию miR-196a в WAT после введения CL-316,243 (фиг. 4C). Основываясь на обнаружении, что экспрессия miR-196a индуцируется во время коричневого адипогенеза в WAT у мышей, мы затем исследовали, требуется ли индукция miR-196a для индукции коричневого адипогенеза и подавления Hoxc8. In vitro экспрессия miR-196a индуцируется во время дифференцировки клеток-предшественников WAT, полученных как от мышей (фиг. 4D), так и от человека (фиг. S4A).Более подробный анализ показал, что miR-196a индуцируется форсколином, активатором аденилатциклазы, что подразумевает значительную роль пути циклического АМФ в регуляции экспрессии miR-196a (Рисунок S4B). Чтобы удовлетворить потребность в miR-196a в коричневом адипогенезе, антисмысловой олигонуклеотид (ASO) против mR-196a трансфицировали в мышиные SVF-клетки. Экспрессия miR-196a подавлялась в трансфицированных клетках (фиг. 4E), а экспрессия Hoxc8 восстанавливалась в трансфицированных адипоцитах (фиг. 4F), что указывает на то, что подавление Hoxc8 опосредовано miR-196a.ASO против miR-196a подавлял экспрессию Ucp1 (Рисунок 4G и 4H) и других генов бурого жира (Рисунок 4H), но не экспрессию лептина , что указывает на то, что miR-196a необходима для гена бурого жира. выражение. Таким образом, активация miR-196a необходима для индукции экспрессии гена бурого жира во время дифференцировки клеток-предшественников WAT.

Рисунок 4. miR-196a индуцируется в клетках SVF во время коричневого адипогенеза и требуется для экспрессии UCP1 .

(A) Экспрессия miR-196a в депо ingWAT мышей, содержащихся при 4 ° C (холод) или при температуре окружающей среды в течение 5 часов ( n = 6), и мышей, получавших CL-316,243 (CL ) или физиологический раствор в течение 7 дней подряд ( n = 6). Результаты нормализованы к U6 . (B) Экспрессия miR-196a в клетках WAT-SVF мышей, подвергшихся воздействию холода, или CL-316,243 (CL, n = 6). Данные нормализованы к U6 . (C) Гибридизация miR-196a in situ в депо ingWAT мышей, обработанных CL-316,243 или физиологическим раствором.Срезы зондировали антисмысловым (AS) зондом miR-196a или контрольным (Ctrl) зондом. Полоски размера указывают 50 мкм. Все данные представлены с помощью ± SEM; * p <0,05. (D) Уровни экспрессии miR-196a в клетках SVF мыши во время дифференцировки in vitro. (E) Уровень экспрессии miR-196a в клетках SVF мыши, трансфицированных антисмысловыми олигонуклеотидами (ASO) против miR-196a. (F) Иммуноблоты для Hoxc8 в мышах SVF-клетках, трансфицированных ASO против miR-196a или контрольными (Ctrl) олигонуклеотидами после дифференцировки.β-актин служил контролем нагрузки. (G) Иммуноблоттинг на Ucp1 в мышах SVF-клетках, трансфицированных ASO против miR-196a или Ctrl oligo, с последующей адипогенной индукцией. β-актин служил контролем нагрузки. (H) Уровни экспрессии мРНК в мышиных SVF-клетках, трансфицированных ASO против miR-196a или контрольных (Ctrl) олигонуклеотидов, с последующей индукцией дифференцировки. Результаты были нормализованы до β-актина . Все данные представлены с помощью ± SEM; * p <0,05.

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pbio.1001314.g004

Далее мы попытались обобщить вышеприведенные данные для обычного коричневого адипогенеза, который происходит в iBAT. Уровень экспрессии miR-196a был значительно ниже в iBAT, чем в WAT (рисунок S4C), и не изменился во время дифференцировки клеток iBAT-SVF (рисунок S4D), что позволяет предположить, что miR-196a может не участвовать в обычном коричневом адипогенезе в iBAT. . Кроме того, эндогенная экспрессия Hoxc8 не была обнаружена в клетках iBAT-SVF (фигура S5).Взятые вместе, miR-196a активируется в клетках-предшественниках WAT во время индуцируемого коричневого адипогенеза у мышей и требуется для индукции экспрессии гена коричневого жира.

miR-196a индуцирует гены коричневого жира посредством подавления Hoxc8
Затем мы спросили, является ли Hoxc8 важной мишенью miR-196a для индукции генов бурого жира. Мы клонировали Hoxc8-3’UTR дикого типа (Hoxc8-wt3’UTR) и miR-196a с удаленным сайтом связывания (Hoxc8-ΔmiR-196-BS) Hoxc8-3’UTR в ретровирусный вектор pCX4 и трансдуцировали эти конструкции в предшественник WAT человека. ячеек (рисунок S6A).Уровни экзогенной экспрессии были сопоставимы среди конструкций (фигура S6A). После адипогенной индукции экспрессия белка Hoxc8 была подавлена в клетках, трансдуцированных Hoxc8-wt3’UTR, чем в клетках, трансдуцированных Hoxc8-ΔmiR-196-BS или Hoxc8 (рис. S6B), что позволяет предположить, что подавление Hoxc8 было зависимым на сайте связывания miR-196a в 3’UTR Hoxc8. Экспрессия гена бурого жира была специфически высокой в клетках, транслируемых Hoxc8-wt3’UTR (фиг. S6C), что указывает на то, что индукция генов бурого жира регулируется способом, зависимым от сайта связывания miR-196a мРНК Hoxc8.Эти результаты подтверждают, что miR-196a регулирует гены бурого жира посредством супрессии Hoxc8. Чтобы дополнительно подтвердить, что подавление Hoxc8 является важным этапом, Hoxc8 был сбит с помощью Hoxc8 shRNA (Рисунок S7). В результате были индуцированы гены бурого жира, включая C / EBPβ и Ucp1 (фиг. S7A и S7B), что указывает на то, что подавление Hoxc8 является критическим шагом для индукции генов бурого жира.
miR-196a индуцирует коричневые адипоцитоподобные клетки в WAT
На основании открытия, что miR-196a необходима для индуцибельного коричневого адипогенеза, мы затем выяснили, способна ли miR-196a индуцировать коричневый адипогенез у мышей.Мы создали трансгенных мышей, у которых miR-196a и EGFP экспрессировались под контролем промотора / энхансера aP2 , который активен исключительно в жировых тканях [30]. Трансгенные мыши (далее мыши miR-196a) родились с менделевским соотношением и были жизнеспособными. Клетки SVF, выделенные от мышей miR-196a, были EGFP-отрицательными сразу после выделения, но они стали EGFP-положительными, пока они хранились в культуре (Рисунок S8A) и экспрессировали miR-196a (Рисунок S8B), что привело к подавлению Hoxc8 (Рисунок S8B). S8C и S8D).После индукции дифференцировки клетки более интенсивно экспрессировали EGFP и подвергались адипогенезу. Активность промотора aP2 наблюдалась в фибробластоподобных клетках в депо ingWAT (фиг. S8E), которые могут представлять жировые клетки-предшественники, подвергающиеся адипогенезу. Клетки SVF, выделенные от мышей miR-196a, экспрессировали гены коричневого жира более высоко, чем клетки от мышей дикого типа (WT) после дифференцировки in vitro (рисунок S8F), что указывает на то, что miR-196a способствует дифференцировке коричневых адипоцитов WAT- клетки-предшественники.Чтобы спросить, является ли функция miR-196a клеточно-автономной, клетки-предшественники WAT человека трансдуцировали лентивирусом, экспрессирующим miR-196a. В результате miR-196a усиливает экспрессию гена бурого жира во время дифференцировки, указывая на клеточно-автономную функцию miR-196a (Рисунок S9).
In vivo, анализ экспрессии генов выявил индукцию генов бурого жира, включая C / EBPβ , Prdm16 и Ucp1 в ingWAT (рис. 5A), а гистологический анализ выявил кластеры мультилокулярных клеток с Выражение Ucp1 (рисунок 5B).Известно, что разные депо WAT в разной степени реагируют на стимуляцию, индуцирующую бурый жир [31], и поэтому мы рассмотрели ответы на экспрессию miR-196a в разных жировых депо. Уровни экспрессии miR-196a были сопоставимы среди различных жировых отложений у мышей miR-196a (Фигуры 5C и S10). Индукция C / EBPβ, Ucp1 и Pgc-1α была более заметной в ingWAT, чем в epiWAT (фиг. 5D и 5E), и дополнительно увеличивалась после обработки CL-316,243 (фиг. 5D и 5E).В iBAT не наблюдалось заметного влияния miR-196a (рис. 5D и 5E). Таким образом, miR-196a индуцирует коричневые адипоцитоподобные клетки с характерным внешним видом и профилем экспрессии генов коричневых адипоцитов в WAT.
Мыши miR-196a демонстрируют устойчивость к ожирению и улучшенному метаболизму глюкозы
На основании открытия, что miR-196a способна индуцировать коричневые адипоцитоподобные клетки, мы затем выяснили, были ли они метаболически функциональными. Мыши miR-196a демонстрировали тенденцию к похуданию, чем мыши WT (фигура 6B), и даже при питании с высоким содержанием жиров они проявляли устойчивость к ожирению (фигуры 6A и 6B), несмотря на то, что их потребление пищи имело тенденцию быть увеличенным по сравнению с таковым у однопометников WT (Рисунок 6C).Снижение веса было связано с уменьшением накопления жира (Рисунок S11). Чтобы выяснить механизм устойчивости мышей miR-196a к ожирению, была проведена непрямая калориметрия. Мы использовали мышей с аналогичной массой тела при нормальной диете. В результате потребление кислорода (фиг.6D) и расход энергии (фиг.6E и таблица S1) были увеличены как во время светлой, так и в темной фазы у мышей miR-196a по сравнению с мышами WT, что указывает на ускоренный энергетический метаболизм.Разница в потреблении кислорода и расходе энергии даже увеличилась, когда мышей кормили диетой с высоким содержанием жиров (Рисунок S12). Внутренняя температура тела была выше у мышей miR-196a, чем у мышей WT (рис. 6F). Эти находки предполагают, что miR-196a усиливает сжигание клеточной энергии за счет индукции коричневых адипоцитоподобных клеток. Затем мы проанализировали влияние miR-196a на метаболизм глюкозы у мышей miR-196a. В тестах на толерантность к глюкозе мыши miR-196a показали более низкие уровни глюкозы в крови (фиг. 6G) и инсулина (фиг. 6H).После введения инсулина у них наблюдалось более выраженное снижение уровня глюкозы в крови (рис. 6I). Эти результаты предполагают, что miR-196a предотвращает развитие у мышей инсулинорезистентности, преморбидного состояния диабета 2 типа. Взятые вместе, эти данные свидетельствуют о том, что индуцированные miR-196a коричневые адипоцитоподобные клетки являются метаболически функциональными и оказывают благоприятное влияние на метаболизм глюкозы у мышей.
Рисунок 6. Мыши miR-196a демонстрируют устойчивость к ожирению и улучшенный метаболизм глюкозы.
(A) Внешний вид мышей WT и miR-196a, получавших диету с высоким содержанием жиров в течение 16 недель. (B) Масса тела мышей WT и miR-196a ( n = 8), получавших диету с высоким содержанием жиров (HFD) или нормальную диету (ND), в возрасте 8 недель. (C) Ежедневное потребление пищи мышами WT и miR-196a ( n = 8). (D) Уровни потребления кислорода (V˙O2) у мышей WT и miR-196a, получавших нормальную диету ( n = 6). Измерения проводились на 3–4-месячных мышах с аналогичной массой тела, которым давали стандартную диету.(E) Расход энергии у мышей WT и miR-196a, получавших нормальный рацион ( n = 6), рассчитан на основе значений V˙O2 и V˙CO2 и усреднен отдельно для светлой и темной фаз. Измерения проводились на 3–4-месячных мышах с аналогичной массой тела, которым давали стандартную диету. (F) Основные температуры тела мышей WT и miR-196a ( n = 6). (G) Результаты теста на толерантность к глюкозе для мышей WT и miR-196a ( n = 10). (H) Концентрации инсулина в плазме после инъекции глюкозы у мышей WT ( n = 8) и miR-196a ( n = 10).(I) Тест на толерантность к инсулину для мышей WT и miR-196a ( n = 10). Все данные представлены как средние значения ± стандартная ошибка среднего; * p <0,05.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.g006
Hoxc8 нацелен на C / EBPβ в сотрудничестве с HDAC3 для регуляции генов коричневого жира
Концепция, что miR-196a индуцирует коричневый адипогенез посредством подавления Hoxc8, который может функционировать как привратник коричневого адипогенеза в WAT, облегчила нам исследование гена-мишени фактора транскрипции Hoxc8.Анализ иммунопреципитации хроматина (ChIP) среди генов-кандидатов выявил значительное обогащение Hoxc8 в локусе C / EBPβ в геноме мыши (фигура 7A). C / EBPβ является важным регулятором коричневого адипогенеза, который высоко экспрессируется в BAT по сравнению с WAT [23]. Обогащение было обнаружено в 3′-области, которая обеспечивает высокую степень межвидовой сохранности (Рисунок 7B, «4»). В человеческих клетках-предшественниках WAT также наблюдалось обогащение HOXC8 в 3′-области C / EBPβ (фиг. 7C и 7D).Обогащение HOXC8 также наблюдалось в промоторе гена остеопонтина ( OPN ), используемого в качестве положительного контроля (рис. 7C) [32]. Чтобы спросить, имеет ли связывание Hoxc8 в 3 ‘ C / EBPβ регуляторную роль, мы выполнили репортерный анализ, заменив кодирующую область C / EBPβ геном люциферазы . Действительно, 3 ‘последовательность C / EBPβ индуцировала люциферазную активность, которая дополнительно усиливалась адипогенной стимуляцией (фиг. 7E).Эта экспрессия люциферазы подавлялась сопутствующей трансфекцией Hoxc8 , но не трансфекцией Hoxc8 мутантным гомеодоменом (HDm), лишенным ДНК-связывающей способности (рис. 7F) [33]. Эти результаты предполагают, что Hoxc8 регулирует экспрессию C / EBPβ через регуляторную последовательность C / EBPβ 3 ‘. Кроме того, подавляющий эффект Hoxc8 был отменен трихостатином А, ингибитором гистондеацетилазы (HDAC), что указывает на то, что подавляющий эффект включает деацетилирование гистона (рис. 7G).В этом отношении Hoxc8 взаимодействует с HDAC3 (Figure 7H) [34] — [35], но не с HDAC1 или HDAC2. Взаимодействие не зависело от способности Hoxc8 связывать ДНК (рис. 7I). Чтобы дополнительно подтвердить, что HDAC3 кооперируется с Hoxc8 , HDAC3 подавлялся с помощью siRNA (фиг. 7J), что приводило к частичному устранению подавляющих эффектов Hoxc8 (фиг. 7K). Чтобы продемонстрировать, что C / EBPβ является важной мишенью для Hoxc8, C / EBPβ трансфицировали в клетки-предшественники WAT человека, которые стабильно экспрессировали HOXC8 человека, что привело к восстановлению экспрессии гена коричневого жира, которая была подавляется HOXC8 (Рисунок 7L).Таким образом, Hoxc8 нацеливается и репрессирует C / EBPβ HDAC3-зависимым образом.
Рисунок 7. HOXC8 нацелен на C / EBPβ в сотрудничестве с HDAC3 для регуляции генов бурого жира.
(A) Анализ ChIP в преадипоцитах 3T3-L1, экспрессирующих Flag- Hoxc8 в локусе C / EBPβ мыши. h2foo является специфическим для ооцитов геном и служит отрицательным контролем. Цифры 1–4 в C / EBPβ соответствуют 1–4 в (B) соответственно. (B) Межвидовая консервация мыши C / EBPβ 3 ‘.Данные получены из карты браузера генома UCSC. (C) ChIP-анализ человеческих клеток-предшественников WAT в локусе C / EBPβ человека. Остеопонтин ( OPN ) служил положительным контролем. (D) Межвидовая консервация и расположение праймеров ChIP, использованных в (C), в локусе C / EBPβ человека. Данные получены из карты браузера генома UCSC. (E) Анализ люциферазного репортера для оценки транскрипционной активности 3′-последовательности C / EBPβ , вставленной в 3′-конец гена люциферазы.Активность измеряли в преадипоцитах 3T3-L1, оставленных необработанными (необработанными) или индуцированными адипогенезом (индукция). * p <0,05. ^♯ p <0,05. (F) Люциферазная репортерная активность 3'-последовательности C / EBPβ , измеренная в преадипоцитах 3T3-L1, трансфицированных Hoxc8 , гомеодомен-мутированным Hoxc8 (HDm) или контрольном векторе. (G) Репортерная активность люциферазы в преадипоцитах 3T3-L1, трансфицированных Hoxc8, HDm или контрольным вектором, в присутствии трихостатина А, ингибитора гистондеацетилазы (HDAC).(H) Иммунопреципитация в преадипоцитах 3T3-L1, стабильно экспрессирующих Flag-Hoxc8. Иммуноблот-анализ проводили после иммунопреципитации антителом против Flag. Белая точка указывает на неспецифическую полосу. (I) Иммунопреципитация в преадипоцитах 3T3-L1, стабильно экспрессирующих Flag-HDm. Иммуноблот-анализ проводили после иммунопреципитации антителом против Flag. Белая точка указывает на неспецифическую полосу. (J) Иммуноблоттинг HDAC3 в преадипоцитах 3T3-L1, трансфицированных миРНК против HDAC3 .(K) Люциферазная репортерная активность в преадипоцитах 3T3-L1, трансфицированных Hoxc8 и миРНК против HDAC3 . (L) Уровни экспрессии мРНК в человеческих клетках-предшественниках WAT, стабильно экспрессирующих HOXC8 с последующей трансфекцией C / EBPβ или EGFP и адипогенной индукцией. Все данные представлены как средние значения ± стандартная ошибка среднего. * p <0,05. n.s., не имеет значения.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.g007
Таким образом, во время коричневого адипогенеза, вызванного воздействием холода или β3-адренергической стимуляцией, miR-196a индуцируется в клетках-предшественниках WAT и подавляет Hoxc8, который нацелен на C / EBPβ , важный регулятор коричневого адипогенеза.Экспрессия miR-196a необходима для экспрессии гена коричневого жира и достаточна для индукции метаболически функциональных коричневых адипоцитоподобных клеток в WAT у мышей. Наши результаты предполагают терапевтический потенциал нацеливания на сигнальный путь miR-196a- Hoxc8 — C / EBPβ , который индуцирует метаболически функциональные коричневые адипоциты в WAT для лечения ожирения и связанных с ним заболеваний.
Обсуждение
Недавние открытия метаболически активных BAT у взрослых людей выдвинули на первый план BAT как терапевтическую мишень для лечения ожирения и связанных с ним заболеваний.Коричневые адипоцитоподобные клетки в WAT могут образовываться в результате воздействия холода или β-адренергической стимуляции у грызунов, но молекулярные механизмы, лежащие в основе этих явлений, полностью не выяснены. В этой работе мы выяснили, что miR-196a индуцирует функциональные коричневые адипоциты в WAT у мышей. miR-196a активируется в клетках-предшественниках WAT во время коричневого адипогенеза, индуцированного холодовой или β-адренергической стимуляцией. miR-196a необходима для экспрессии гена коричневого жира и достаточна для индукции метаболически функциональных коричневых адипоцитоподобных клеток у мышей.Целевым геном miR-196a является Hoxc8 , который классифицируется как ген белого жира, роль которого в адипогенезе ранее была подорвана. Hoxc8 непосредственно нацелен на и репрессирует C / EBPβ , главный переключатель коричневого адипогенеза. Таким образом, путь miR-196a- Hoxc8 — C / EBPβ лежит в основе коричневого адипогенеза при WAT (фиг. 8) и может быть терапевтической мишенью для лечения ожирения и диабета 2 типа.
Фигура 8. Схема регулируемого miR-196a коричневого адипогенеза клеток-предшественников WAT.
Низкие температуры или β3-адренергическая стимуляция индуцируют miR-196a в резидентных WAT клетках-предшественниках у мышей. miR-196a посттранскрипционно подавляет Hoxc8 , который является одним из генов белого жира. Непосредственной мишенью Hoxc8 является C / EBPβ , главный переключатель коричневого адипогенеза, который вызывает программу гена коричневого жира в клетках-предшественниках WAT.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.g008
Выяснение молекулярного механизма, регулирующего коричневый адипогенез при WAT, важно как с биологической, так и с клинической точки зрения.Недавние исследования обнаружили существование клеток-предшественников WAT, которые обладают потенциалом дифференцироваться в коричневые адипоциты [16], [21] — [22], [36]. Молекулярный механизм индуцибельного коричневого адипогенеза при WAT относительно неизвестен, но недавние исследования выяснили важность cyclooxygenase-2 [36] — [37] и Prdm16 [38]. C / EBPβ является важным регулятором программы генов бурого жира [23], [39] — [41], но вопрос о том, играет ли C / EBPβ значительную роль в индуцируемом коричневом адипогенезе, до конца не изучено.Мы обнаружили, что miR-196a подавляет Hoxc8 , тем самым подавляя C / EBPβ , что приводит к активации программы гена бурого жира. Наши результаты указывают на значимость C / EBPβ не только в обычном коричневом адипогенезе, но также и в индуцибельном коричневом адипогенезе при WAT.
Клеточное происхождение индуцибельных коричневых адипоцитоподобных клеток в WAT является важным вопросом. Трансдифференцировка является важным механизмом, который, как сообщается, вносит вклад в рекрутирование коричневых адипоцитов в WAT [42] — [43].Поскольку увеличение мРНК Ucp1 обнаруживается в течение нескольких часов после стимуляции холодом [1], [31], а дифференцировка клеток SVF in vitro является более длительным процессом, трансдифференцировка может играть важную роль в быстром ответе на стимуляцию. Важные вопросы включают относительный вклад трансдифференцировки и механизма, опосредованного клетками-предшественниками, в привлечении коричневых адипоцитов на протяжении различных фаз при воздействии холода и физиологической регуляции энергии.
miRNAs регулируют генные сети, лежащие в основе различных физиологических и патологических явлений, и могут быть терапевтическими мишенями [18] — [19], [44] — [46]. miR-196a участвует в дифференцировке остеобластов in vitro человеческих жировых клеток-предшественников, где miR-196a подавляет Hoxc8 [47], но актуальность in vivo остается неизвестной. Мы выяснили, что miR-196a индуцируется в клетках-предшественниках WAT после индукции коричневого адипогенеза, требуется для индукции экспрессии гена коричневого жира и достаточна для индукции метаболически функциональных коричневых адипоцитоподобных клеток в WAT.
Наши наблюдения показывают, что miR-196a оказывает лишь умеренное влияние на iBAT. Эндогенная экспрессия Hoxc8 и miR-196a была намного ниже в iBAT, чем в ingWAT и epiWAT. Вынужденная экспрессия miR-196a у мышей не давала заметных эффектов в iBAT. Обработка мышей агонистами β3-адренергических рецепторов обычно приводит к гораздо более умеренной индукции экспрессии Ucp1 в iBAT, чем в депо WAT. Хотя первичные культуры коричневых адипоцитов из iBAT очень чувствительны к β3-адренергической активации [1], умеренная, но значимая индукция Ucp1 была обнаружена в iBAT в ответ на агонисты β3-адренорецепторов in vivo [48].Относительно умеренный ответ iBAT на агонист β3-адренергических рецепторов по сравнению с подкожным и висцеральным WAT также был зарегистрирован в других исследованиях [16], [43], [49]. Эти результаты предполагают, что разные механизмы регулируют рекрутирование коричневых адипоцитов в iBAT, что ранее было предложено Petrovic et al. [21].
Ряд miRNAs функционируют как молекулярные переключатели [46], [50] — [53], и дальнейшее выяснение того, как miRNAs влияют на физиологический выход, позволит лучше понять и клиническое использование miRNAs.
Значение различных паттернов экспрессии Hox-генов между BAT и WAT неизвестно [10] — [12]. Здесь мы демонстрируем, что Hoxc8 действует как важная детерминанта происхождения белого жира и негативно регулирует индукцию коричневого адипогенеза в клетках-предшественниках WAT путем репрессии C / EBPβ , который является главным переключателем коричневого адипогенеза [39] — [41] . Механически Hoxc8 непосредственно репрессирует экспрессию C / EBPβ через 3′-регуляторную последовательность.Сходные консервативные некодирующие регуляторные элементы описаны для гена Foxp3 [54], а предыдущие исследования показали, что большинство факторов транскрипции связывается с сайтами, отличными от промотора [20], [55]. Hoxc8 рекрутирует HDAC3, который участвует в регуляции метаболических генов [34], [35]. Поскольку белки HDAC не обладают ДНК-связывающей активностью, они привлекаются к генам-мишеням посредством ассоциации с факторами транскрипции [56]. Наши результаты предполагают возможную терапевтическую эффективность ингибиторов HDAC при ожирении за счет индукции коричневого адипогенеза, но для рассмотрения этой возможности необходимы дальнейшие исследования.
Индукция коричневого адипогенеза в WAT имеет большой терапевтический потенциал. Наши находки показывают, что путь miR-196a- Hoxc8 — C / EBPβ может представлять собой многообещающую стратегию решения социальных проблем и проблем со здоровьем, вызванных ожирением и связанными с ним заболеваниями.
Материалы и методы
Заявление об этике
С
мышей обращались в соответствии с протоколами, утвержденными Комитетом по этике экспериментов на животных Высшей школы медицины Университета Осаки.
Плазмиды
Кодирующая последовательность человеческого Hoxc8 (ID гена: 3224) была клонирована в вектор pCX4-puro [57] и pCAGIP [58]. Ретровирусный вектор pCX4- Hoxc8 использовали для создания человеческих клеток-предшественников WAT, стабильно экспрессирующих Hoxc8 . Человеческий C / EBPβ был клонирован в вектор pCAGIP. Мутант гомеодомена (I195A / Q198A / N199A / M202A) [33] Hoxc8 (HDm) был создан посредством сайт-направленного мутагенеза. Для опосредованной лентивирусом экспрессии shRNA pLenti6-miR-196a, -shHoxc8 и -shLacZ были созданы из pcDNA6.2 конструкции по реакциям шлюза. Лентивирус был получен котрансфекцией конструкции pLenti6 с упаковкой плазмид в клетки 293FT в соответствии с инструкциями производителя (Invitrogen). Для анализа 3’UTR Hoxc8 последовательность 3’UTR человека Hoxc8 клонировали и вставляли на 3′-конец кДНК Hoxc8. Сайт связывания miR-196a (CCCAACAACTGAGACTGCCTA) был удален с образованием Hoxc8-ΔmiR-196a-BS.
Анализ экспрессии генов
Общую РНК
выделяли с использованием набора RNeasy Lipid Tissue Mini (QIAGEN, CA).Обратную транскрипцию и количественную ПЦР проводили, как описано ранее [59]. Для количественного определения микроРНК общую РНК выделяли с использованием набора для выделения miRNA mirVana (Applied Biosystems). Обратную транскрипцию и количественную ПЦР проводили в соответствии с инструкциями производителя. Список датчиков представлен в тексте S1.
РНК-seq
РНК из клеток-предшественников белого жира человека (WAT) экстрагировали с помощью RNeasy (QIAGEN) в соответствии с инструкциями производителя.12,5 мкг общей РНК подвергали двум циклам очистки олиго-dT с использованием набора Ambion MicroPoly (A) Purist Kit (Ambion). 50 нг фрагментированной поли (A) РНК с использованием РНКазы III лигировали в смесь адаптеров SOLiD и подвергали обратной транскрипции с использованием набора SOLiD Total RNA-Seq Kit (Life Technologies). Первую нить кДНК от 100 до 150 пар оснований отбирали с использованием реагента Agencourt AMPure XP (Beckman Coulter Genomics) и амплифицировали с помощью праймера SOLiD 5 ‘PCR и штрих-кодированных праймеров SOLiD 3’ PCR (Life Technologies).Библиотеки секвенирования были приготовлены в соответствии с протоколом Life Technologies. Библиотеки РНК-seq секвенировали с помощью SOLiD 4. Картирование полученных прочтений было выполнено с помощью Bioscope (Life Technologies), а анализ сопоставленных прочтений (31 825 850 считываний в hADSC_1 и 42 009 231 считываний в hADSC_2) был выполнен с помощью Cufflinks [60].
Культура клеток
Клетки-предшественники WAT человека выделяли из липоаспирата подкожного жира человека (Lonza, Швейцария) и поддерживали в среде для роста мезенхимальных стволовых клеток (Lonza).Для адипогенеза 2-дневные постконфлюэнтные клетки обрабатывали индукционной средой, содержащей 0,5 мМ IBMX, 10 мкг / мл инсулина и 1 мкМ дексаметазон (MDI). Среду для индукции меняли каждые 2 дня. Форсколин (40 мкМ, Sigma-Aldrich) добавляли в среду, как указано. Антисмысловой олигонуклеотид против miR-196a (анти-miR ингибитор miRNA, AM10068, Ambion) трансфицировали в соответствии с инструкциями производителя. Клетки-предшественники жира выделяли из паховой белой жировой ткани (WAT) или межлопаточной BAT (iBAT) мышей C57Bl / 6 стандартным методом [61].Адипогенную индукцию проводили путем обработки клеток индукционной средой в течение 2 дней.
Вестерн-блоттинг
Вестерн-блоттинг проводили с антителами против Hoxc8 (1-1000, ab86236, abcam), C / EBPβ (1-200, sc-150, Santa Cruz Biotechnology, CA), UCP1 (1-1000, U6382, Sigma- Aldrich), PGC-1α (1–1000, ab54481, abcam), β-актин (1–5000, AC-15, Sigma-Aldrich) и GAPDH (1–5000, ab8245, abcam). Вторичные антитела (GE Healthcare) использовали в соотношении разведения 1–1000.Иммунореактивные полосы были обнаружены с помощью Chemi-LumiOne L (Nacalai Tesque) или ECL plus (GE Healthcare). Денситометрию выполняли с помощью программного обеспечения ImageJ (NIH; http://rsb.info.nig.gov/ij/).
Иммуноцитохимия
Иммуноцитохимия выполнялась с использованием антител против Hoxc8 (1–200, MMS-286R, Covance), Hoxc6 (1–200, ab41587, Abcam), Pgc-1α (1–300, ab54481, Abcam) или UCP1 (1–500 , ab10983, Abcam), как описано ранее [59]. Первичные антитела детектировали с использованием антител против Alexa Fluor 546 мыши, Alexa Fluor 488 мыши против Alexa или Fluor 546 кролика (1-1000, Invitrogen).Клетки контрастировали с помощью CellTracker Green Bodipy (Invitrogen), Bodipy 493/503 (D3922, Invitrogen) и 4′-6-диамидино-2-фенилиндола (DAPI, Invitrogen).
Мыши
Эти эксперименты были одобрены Комитетом по этике экспериментов на животных Высшей школы медицины Университета Осаки. Использовали беспородных мышей-самцов C57Bl / 6. Для исследований острого воздействия холода самцов мышей в возрасте от 3 до 4 месяцев содержали при 4 ° C в течение 5 часов. Для стимуляции рецептора β3-адреналина, CL-316,243 (Sigma), при 0.5 мг / кг вводили внутрибрюшинно один раз в день в течение 7 дней. Трансгенных мышей с жиро-специфической форсированной экспрессией miR-196a получали с использованием трансгена, кодирующего miR-196a, управляемого энхансером / промотором гена aP2 [30], а однопометники использовали в качестве контроля дикого типа.
Гистологический анализ
срезов пахового жира фиксировали в 10% забуференном формалине и окрашивали гематоксилин-эозином. Для иммуногистохимии залитые парафином срезы инкубировали с антителами против UCP1 (1-1000, ab10983, Abcam) с последующим обнаружением с использованием набора ABC Vectastain-Elite (Vector Labs).Ядра контрастировали с модифицированным гематоксилином Майера (Diagnostic BioSystems).
miRNA Гибридизация in situ
Паховые депо WAT мышей вскрывали после перфузии и фиксации Tissue Fixative (Genostaff), заливали в парафин и делали срезы толщиной 6 мкм. Срезы депарафинизировали ксилолом и регидратировали. Срезы фиксировали 4% параформальдегидом (PFA) в течение 15 минут, обрабатывали 8 мкг / мл протеиназы K в течение 30 минут при 37 ° C, повторно фиксировали 4% PFA и помещали в 0.2 N HCl в течение 10 мин. Срезы ацетилировали 0,1 М триэтаноламин-HCl, pH 8,0, и 0,25% уксусным ангидридом в течение 10 мин. После промывания PBS срезы обрабатывали PBS при 80 ° C в течение 5 мин. Срезы гибридизировали с 3′-дигоксигенированными зондами (18 пмоль / мл, miR-196a-AS-LNA1: cCcaAcaAcaTgaAacTacCta, Control (Ctrl) -LNA1: cGacTacAcaAatCagCgaTtt, заглавные буквы обозначают LNA) в Probe Diluent-1 (Genostaff). C в течение 16 часов и промывали в 5 × HybriWash (Genostaff) при 50 ° C в течение 20 минут, 50% формамидом в 2 × HybriWash при 50 ° C в течение 20 минут, дважды в 2 × HybriWash при 50 ° C в течение 20 минут, и дважды в 0.2 × HybriWash при 50 ° C в течение 20 мин. Срезы обрабатывали 0,5% блокирующим реагентом (Roche) в TBST в течение 30 минут и инкубировали с конъюгатом анти-DIG AP (1-1000, Roche) в течение 2 часов при комнатной температуре. Срезы дважды промывали TBST и инкубировали в растворе с составом 1000 мМ NaCl, 50 мМ MgCl ₂, 0,1% Твин-20, 100 мМ Трис-HCl, pH 9,5. Реакции окрашивания проводили с раствором NBT / BCIP (Sigma) в течение ночи с последующим контрастным окрашиванием раствором красителя Кернехтрот (Mutoh).
Метаболические измерения
Мышам давали стандартную диету или диету с высоким содержанием жиров (20,4% белка, 33,2% жира, 46,4% углеводов по калориям; MF +; Oriental Yeast Co., Япония). Метаболические измерения проводились на 3–4-месячных мышах с аналогичной массой тела, которым давали стандартную диету. Потребление пищи и массу тела измеряли соответственно ежедневно и еженедельно. Для тестов на толерантность к глюкозе мышей лишали пищи на 16 ч и внутрибрюшинно вводили глюкозу (2 г / кг).Для тестов на толерантность к инсулину мышам был предоставлен доступ к пище ad libitum с последующей внутрибрюшинной инъекцией человеческого инсулина (0,75 Ед / кг, Eli Lilly). Концентрацию глюкозы в плазме измеряли глюкометром (Sanwa Kagaku Kenkyusho, Япония), а инсулин измеряли с помощью ELISA (Институт биологических наук Моринага, Япония). Непрямая калориметрия выполнялась при 12-часовом цикле освещения и темноты, начиная с 8:00 и 20:00 соответственно. После 1 дня акклиматизации V˙O ₂ и V˙CO ₂ регистрировались каждые 3 минуты в течение 3 дней с использованием системы измерения метаболизма (MK-5000, Muromachi Kikai, Япония).Расход энергии (EE) был рассчитан с использованием уравнения Weir: EE (ккал / кг / ч) = (3,815 × V˙O ₂) + (1,232 × V˙CO ₂). Для измерения температуры тела мышей содержали поодиночке, без ограничений и свободного доступа к пище и воде. Температуру тела измеряли с помощью ректального зонда (Perimed, Швеция).
Анализы Native ChIP
Иммунопреципитация хроматина была выполнена, как описано ранее [62], с преадипоцитами 3T3-L1, экспрессирующими Flag-tagged Hoxc8 человека.Последовательности праймеров перечислены в тексте S1.
Люциферазные анализы
Конструкции C / EBPβ3 ‘ -люциферазы ( C / EBPβ -Luc) были получены путем клонирования 3′-последовательности гена C / EBPβ человека (от +1,021 до +1,837) ниже гена люциферазы. в плазмиде промотора pGL3 (Promega). Двойные люциферазные анализы проводили, как описано ранее [62], с преадипоцитами 3T3-L1. Трихостатин А (330 нМ, Sigma-Aldrich) добавляли через 4 часа после трансфекции, как указано.Миссия миРНК (Sigma) для HDAC3 (смысл: 5’GUAUCCUGGAGCUGCUUAATT, антисмысловой: 5’UUAAGCAGCUCCAGGAUACTT) трансфицировали с использованием системы трансфекции Neon (Invitrogen).
Анализ иммунопреципитации
Ядерные экстракты получали, как описано ранее [62], из преадипоцитов 3T3-L1, трансфицированных Flag- Hoxc8 , предварительно обработанных шариками сефарозы с протеином G (Amersham Bioscience) и инкубированных с анти-Flag M2 Affinity Gel (A2220, Sigma-Aldrich). ) или контрольный мышиный IgG AC (Santa Cruz) в течение ночи при 4 ° C.Гранулы промывали 3 раза буфером для выделения ядер, содержащим 500 мМ NaCl и 0,15% NP-40. Очищенные белки подвергали иммуноблоттингу с использованием антител против HDAC1 (3–1000, Millipore), HDAC2 (1–2000, h4159, Sigma) и HDAC3 (1–500, ab16047, Abcam).
Статистика
Статистический анализ был выполнен с помощью программного обеспечения StatView 5.0, JMP8 (Институт SAS, Северная Каролина) и SPSS (IBM). Все результаты выражены как среднее ± SEM. Данные сравнивали с использованием ANOVA, затем теста Даннета для попарных сравнений с контролями и теста Тьюки для множественных сравнений.Для анализа расхода энергии был проведен односторонний ковариационный анализ (ANCOVA). Вес тела использовался в качестве ковариаты. Статистическая значимость была определена как p <0,05.
Регистрационный номер
Данные RNA-seq были отправлены в архив чтения последовательностей NCBI (SRA). Регистрационный номер — SRA048274.1.
Дополнительная информация
Рисунок S1.
Анализ экспрессии генов в клетках-предшественниках WAT человека.(A) Сводка результатов микроматрицы для человеческих клеток-предшественников WAT, трансдуцированных Hoxc8 или контрольным вектором с последующей адипогенной индукцией в течение 14 дней. Уровни экспрессии сравнивали с уровнями в необработанных клетках, и показаны кратные изменения уровней экспрессии. (B) Иммунофлуоресцентный анализ HOXC8 и PGC-1α в человеческих клетках-предшественниках WAT, индуцированных к дифференцировке в течение 14 дней. Ядра окрашиваются DAPI. Шкала показывает 100 мкм. (C) Иммунофлуоресцентный анализ HOXC6 в клетках-предшественниках жира человека, оставленных необработанными (недифференцированными) или индуцированными для дифференцировки в течение 14 дней (адипогенная индукция).Экспрессия HOXC6 поддерживается в дифференцированных клетках (стрелки), которые демонстрируют множественные везикулы. Ядра окрашиваются DAPI. ДИК, дифференциальный интерференционный контраст. Шкала показывает 50 мкм. (D) Распределение экспрессии HOXC6 в тканях у мышей. Данные нормализованы до 18S. Все данные представлены как средние значения ± стандартная ошибка среднего.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.s001
(TIF)
Рисунок S3.
Экспрессия miR-196a и Hoxc8 в SVF и фракции адипоцитов.(A) Уровни экспрессии miR-196a в SVF и фракции адипоцитов мышей, получавших CL-316,243 или физиологический раствор. Результаты нормализованы к U6. (B) Вестерн-блот-анализ Hoxc8 в SVF и фракции адипоцитов мышей, получавших CL-316,243 или физиологический раствор.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.s003
(EPS)
Рисунок S4.
Анализ экспрессии miR-196a. (A) Экспрессия miR-196a повышается во время дифференцировки в человеческих клетках-предшественниках WAT.Результаты нормализованы к U6. (B) Экспрессия miR-196a усиливается обработкой форсколином в человеческих клетках-предшественниках WAT. Результаты нормализованы к U6. (C) Уровни экспрессии miR-196a в различных тканях мышей дикого типа. Результаты нормализованы к U6. (D) Экспрессия miR-196a существенно не изменяется во время дифференцировки клеток SVF, полученных из iBAT (обычный коричневый адипогенез). Результаты нормализованы к U6. Все данные представлены как средние значения ± стандартная ошибка среднего.* p <0,05.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.s004
(EPS)
Рисунок S5.
Анализ экспрессии Hoxc8 в клетках SVF, полученных из iBAT. (A) Иммуноблоты Hoxc8 в клетках iBAT-SVF, обработанных коктейлем для адипогенной индукции или без него. Результаты клеток WAT-SVF были показаны для сравнения. β-актин служил контролем нагрузки. (B) Иммунофлуоресцентный анализ Hoxc8 в недифференцированных клетках iBAT-SVF. Ядра окрашиваются DAPI.Шкала показывает 50 мкм.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.s005
(TIF)
Рисунок S6.
Анализ HOXC8 3’UTR человека. (А) Схема конструкций. Последовательность 3’UTR HOXC8 человека вставляли в 3′-конец кДНК HOXC8 для получения 3’UTR pCX4-HOXC8 дикого типа (wt). Комплементарный сайт miR-196a был удален с образованием pCX4-HOXC8-ΔmiR-196-BS (сайт связывания). (B) Иммуноблоты HOXC8 в человеческих клетках WAT-SVF, трансдуцированных ретровирусным вектором HOXC8, HOXC8-wt3’UTR, HOXC8-ΔmiR-196-BS или контрольным EGFP.Трансдуцированные клетки обрабатывали коктейлем для индукции адипогена или без него. β-актин служил контролем нагрузки. (C) Анализ qRT-PCR генов коричневого жира в трансдуцированных клетках, индуцированных для дифференцировки в течение 14 дней. Результаты нормализованы к 18S. Все данные представлены как средние значения ± стандартная ошибка среднего; * p <0,05.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.s006
(EPS)
Рисунок S7.
Эффекты нокдауна Hoxc8 на экспрессию генов бурого жира.(A) Анализ qRT-PCR генов, связанных с адипогенезом, в клетках WAT-SVF мыши, трансдуцированных контрольной shRNA или shRNA против Hoxc8 с последующей адипогенной индукцией. Результаты были нормализованы по β-актину. Данные представлены в виде средних значений ± стандартная ошибка среднего; ** p <0,01. (B) Иммуноблоты в мышиных SVF-клетках, трансдуцированных контрольной shRNA, shRNA против Hoxc8 или miR-196a, кодируемой лентивирусными векторами. β-актин служил контролем нагрузки.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.s007
(TIF)
Рисунок S8.
Анализ экспрессии генов в клетках-предшественниках WAT, полученных от мышей miR-196a. (A) Флуоресцентный микроскопический вид клеток SVF, полученных от мышей aP2-miR-196a, сохраненных без адипогенной индукции. Шкала показывает 100 мкм. (B) Уровни экспрессии miR-196a в клетках-предшественниках WAT, полученных из паховых WAT мышей WT и miR-196a. Данные были нормализованы до U6. (C, D) Вестерн-блоттинг (C) и иммунофлуоресцентный анализ (D) Hoxc8 в клетках-предшественниках WAT.Масштабные линейки показывают 30 мкм. (E) Конфокальное трехмерное изображение пахового WAT от мыши miR-196a. Сосудистую сеть и ядра визуализировали с использованием антитела против CD31 и DAPI, соответственно. V — сосудистая сеть; F, жировые клетки. (F) Анализ экспрессии генов в клетках-предшественниках WAT, индуцированных адипогенезом в течение 14 дней. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. * p <0,05, ** p <0,01 по сравнению с WT.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.s008
(TIF)
Рисунок S9.
miR-196a функционирует клеточно-автономным образом. (A) Анализ qRT-PCR miR-196a в человеческих клетках WAT-SVF, трансдуцированных miR-196a, кодируемым лентивирусным вектором. Результаты нормализованы к U6. (B) Иммуноблоты HOXC8 в человеческих клетках WAT-SVF, трансдуцированных miR-196a или контрольным miR-LacZ. β-актин служил контролем нагрузки. (C) Анализ qRT-PCR генов бурого жира в человеческих клетках WAT-SVF, трансдуцированных miR-196a или контрольным miR-LacZ, с последующей адипогенной индукцией. Все данные представлены как средние значения ± стандартная ошибка среднего.* p <0,05.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.s009
(TIF)
Рисунок S11.
Снижение веса мышей miR-196a связано с уменьшением накопления жира. (A) Длина тела существенно не отличается у мышей WT и miR-196a ( n = 6). (B) Вес органов мышей WT и miR-196a, получавших диету с высоким содержанием жиров в течение 16 недель ( n = 3). Вес пахового жира, придатка яичка и печени у мышей miR-196a значительно ниже, чем у мышей WT.У мышей WT наблюдается более тяжелая жирная печень, чем у мышей miR-196a. Все данные представлены как средние значения ± стандартная ошибка среднего. * p <0,05. (C) Внешний вид органов мышей WT и miR-196a, получавших диету с высоким содержанием жиров в течение 16 недель.
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.s011
(TIF)
Рисунок S12.
Уровни потребления кислорода и расход энергии у мышей WT и miR-196a, получавших диету с высоким содержанием жиров. (A) Уровни потребления кислорода (V˙O2) у мышей WT и miR-196a ( n = 6) при диете с высоким содержанием жиров.(B) Расход энергии у мышей WT и miR-196a ( n = 6) на диете с высоким содержанием жиров рассчитан на основе значений V˙O2 и V˙CO2 и усреднен отдельно для светлой и темной фаз ( n = 6).
https://doi.org/10.1371/journal.pbio.1001314.s012
(EPS)
Благодарности
Мы благодарим сотрудников лаборатории Канеда за их поддержку и полезные предложения. Мы также благодарим доктора Кадзухиса Маэда (Департамент дополнительной и альтернативной медицины Высшей школы медицины Университета Осаки) за плазмиду промотора / энхансера aP2 и доктораTsuyoshi Akagi (Исследовательский институт KAN) за предоставление ретровирусных векторов pCX4. Мы благодарны доктору Джуро Сакаи (Исследовательский центр передовых наук и технологий, Токийский университет) за вдумчивый совет относительно дизайна исследования.
Вклад авторов
Автор (ы) сделали следующие заявления о своем вкладе: Задумал и разработал эксперименты: MM HN GR KN YK. Проведены опыты: ММ ХН ГР КН. Проанализированы данные: MM HN GR KN YK.Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: MM HN GR KN YK. Написал статью: MM HN GR KN YK.
Ссылки
1. Cannon B, Nedergaard J (2004) Коричневая жировая ткань: функция и физиологическое значение. Physiol Rev 84: 277–359.
2. Nedergaard J, Bengtsson T, Cannon B (2007) Неожиданные доказательства активной коричневой жировой ткани у взрослых людей. Am J Physiol Endocrinol Metab 293: E444 – E452.
3. Сайпесс А.М., Леман С., Уильямс Дж., Таль И., Родман Д. и др. (2009) Идентификация и важность коричневой жировой ткани у взрослых людей. N Engl J Med 360: 1509–1517.
4. ван Маркен Лихтенбельт В. Д., Ванхоммериг Дж. В., Смолдерс Н. М., Дроссартс Дж. М., Кемеринк Г. Дж. и др. (2009) Активированная холодом коричневая жировая ткань у здоровых мужчин. N Engl J Med 360: 1500–1508.
5. Виртанен К. А., Лиделл М. Э, Орава Дж., Хеглинд М., Вестергрен Р. и др. (2009) Функциональная коричневая жировая ткань у здоровых взрослых.N Engl J Med 360: 1518–1525.
6. Зингаретти М.С., Кроста Ф., Витали А., Герриери М., Фронтини А. и др. (2009) Присутствие UCP1 демонстрирует, что метаболически активная жировая ткань на шее взрослых людей действительно представляет собой коричневую жировую ткань. Faseb J 23: 3113–3120.
7. Nedergaard J, Cannon B (2010) Измененный метаболический мир с коричневой жировой тканью человека: терапевтические видения. Cell Metab 11: 268–272.
8. Кузен Б., Чинти С., Моррони М., Реймбо С., Рикье Д. и др.(1992) Появление коричневых адипоцитов в белой жировой ткани крысы: молекулярная и морфологическая характеристика. J Cell Sci 103 (Pt. 4): 931–942.
9. Cinti S (2009) Свойства трансдифференцировки адипоцитов в жировом органе. Am J Physiol Endocrinol Metab.
10. Cantile M, Procino A, D’Armiento M, Cindolo L, Cillo C (2003) Генная сеть HOX участвует в регуляции транскрипции адипогенеза человека in vivo. J. Cell Physiol 194: 225–236.
11. Gesta S, Tseng Y. H, Kahn C. R (2007) Происхождение жира в процессе развития: отслеживание источника ожирения. Ячейка 131: 242–256.
12. Тиммонс Дж. А., Веннмальм К., Ларссон О., Уолден Т. Б., Лассманн Т. и др. (2007) Сигнатура экспрессии миогенного гена устанавливает, что коричневые и белые адипоциты происходят из разных клеточных линий. Proc Natl Acad Sci U S A 104: 4401–4406.
13. Аргиропулос Б., Хамфрис Р. К. (2007) Hox-гены в гемопоэзе и лейкемогенезе.Онкоген 26: 6766–6776.
14. Нагибнева И., Амеяр-Зазоуа М., Полесская А., Айт-Си-Али С., Гройсман Р. и др. (2006) МикроРНК miR-181 нацелена на гомеобоксный белок Hox-A11 во время дифференцировки миобластов млекопитающих. Nat Cell Biol. 8: 278–284.
15. Ваксман Дж. С., Киган Б. Р., Робертс Р. В., Посс К. Д., Йелон Д. (2008) Hoxb5b действует после передачи сигналов ретиноевой кислоты в поле передних конечностей, ограничивая потенциал поля сердца у рыбок данио. Dev Cell 15: 923–934.
16. Шульц Т. Дж., Хуанг Т. Л., Тран Т. Т., Чжан Х., Таунсенд К. Л. и др. (2011) Идентификация индуцибельных предшественников коричневых адипоцитов, находящихся в скелетных мышцах и белом жире. Proc Natl Acad Sci U S A 108: 143–148.
17. Гангараджу В. К., Лин Х (2009) МикроРНК: ключевые регуляторы стволовых клеток. Nat Rev Mol Cell Biol 10: 116–125.
18. Бартель Д. П. (2004) МикроРНК: геномика, биогенез, механизм и функция. Ячейка 116: 281–297.
19. Херранц Х., Коэн С. М. (2010) МикроРНК и сети регуляции генов: управление воздействием шума в биологических системах. Гены Дев 24: 1339–1344.
20. Марсон А., Левин С. С., Коул М. Ф., Фрэмптон Г. М., Брамбринк Т. и др. (2008) Подключение генов микроРНК к основной цепи регуляции транскрипции эмбриональных стволовых клеток. Ячейка 134: 521–533.
21. Петрович Н., Уолден Т. Б., Шабалина И. Г., Тиммонс Дж. А., Кэннон Б., Недергаард Дж. (2010) Активация гамма-рецептора, активируемого хроническим пролифератором пероксисом (PPARgamma), в культурах белых адипоцитов эпидидимального происхождения выявляет популяцию термогенно компетентных, Адипоциты, содержащие UCP1, молекулярно отличаются от классических коричневых адипоцитов.J Biol Chem 285: 7153-7164.
22. Элабд К., Кьеллини С., Кармона М., Галицкий Дж., Коше О. и др. (2009) Человеческие мультипотентные стволовые клетки, полученные из жировой ткани, дифференцируются в функциональные коричневые адипоциты. Стволовые клетки 27: 2753–2760.
23. Каджимура С., Сил П., Кубота К., Лансфорд Э., Франджони Дж. В. и др. (2009) Инициирование переключения миобластов в бурый жир транскрипционным комплексом PRDM16-C / EBP-beta. Природа 460: 1154–1158.
24. Фельдманн Х.М., Голозубова В., Кэннон Б., Недергаард Дж. (2009) Абляция UCP1 вызывает ожирение и отменяет термогенез, вызванный диетой, у мышей, освобожденных от теплового стресса, благодаря термонейтральности. Cell Metab 9: 203–209.
25. Родехеффер М.С., Бирсой К., Фридман Дж. М. (2008) Идентификация клеток-предшественников белых адипоцитов in vivo. Ячейка 135: 240–249.
26. Anand A, Chada K (2000) Модуляция Hmgic in vivo снижает ожирение. Нат Генет 24: 377–380.
27.Джон Б., Энрайт А. Дж., Аравин А., Тушл Т., Сандер С., Маркс Д. С. (2004) Мишени для микроРНК человека. PLoS Biol 2: e363.
28. Yekta S, Shih I.H, Bartel D. P (2004) МикроРНК-направленное расщепление мРНК HOXB8. Наука 304: 594–596.
29. Ma L, Teruya-Feldstein J, Weinberg R. A (2007) Инвазия опухоли и метастазирование, инициированное микроРНК-10b при раке груди. Природа 449: 682–688.
30. Росс С. Р., Грейвс Р. А., Гринштейн А., Платт К.A, Shyu H.L, et al. (1990) Жиро-специфический энхансер является основной детерминантой экспрессии гена адипоцита P2 in vivo. Proc Natl Acad Sci U S A 87: 9590–9594.
31. Guerra C, Koza R.A, Yamashita H, Walsh K, Kozak L.P (1998) Появление коричневых адипоцитов в белом жире у мышей находится под генетическим контролем. Влияние на массу тела и ожирение. Дж. Клин Инвест 102: 412–420.
32. Лей Х, Ван Х, Хуан А. Х, Раддл Ф. Х (2005) Идентификация генов-мишеней Hoxc8.Proc Natl Acad Sci U S A 102: 2420–2424.
33. LaRonde-LeBlanc N. A, Wolberger C (2003) Структура HoxA9 и Pbx1, связанных с ДНК: гексапептид Hox и распознавание ДНК спереди назад. Genes Dev 17: 2060–2072.
34. Кнутсон С. К., Чила Б. Дж., Аманн Дж. М., Бхаскара С., Хупперт С. С., Хиберт С. В. (2008) Печеночно-специфическая делеция гистондеацетилазы 3 нарушает метаболические транскрипционные сети. Embo J 27: 1017–1028.
35. Монтгомери Р.L, Potthoff M.J, Haberland M, Qi X, Matsuzaki S и др. (2008) Поддержание сердечного энергетического метаболизма с помощью гистондеацетилазы 3 у мышей. Дж. Клин Инвест 118: 3588–3597.
36. Vegiopoulos A, Muller-Decker K, Strzoda D, Schmitt I, Chichelnitskiy E, et al. (2010) Циклооксигеназа-2 контролирует энергетический гомеостаз у мышей путем привлечения de novo коричневых адипоцитов. Science 328: 1158–1161.
37. Madsen L, Pedersen L.M, Lillefosse H.H, Fjaere E, Bronstad I, et al.(2010) Индукция UCP1 во время рекрутирования коричневых адипоцитов в белую жировую ткань зависит от активности циклооксигеназы. PLoS One 5: e11391.
38. Сил П., Конро Х. М., Эсталл Дж., Каджимура С., Фронтини А. и др. (2011) Prdm16 определяет термогенную программу подкожной белой жировой ткани у мышей. Дж. Клин Инвест 121: 96–105.
39. Wu Z, Xie Y, Bucher N. L, Farmer S. R (1995) Условная эктопическая экспрессия C / EBP бета в клетках NIH-3T3 индуцирует PPAR-гамма и стимулирует адипогенез.Гены Дев 9: 2350–2363.
40. Karamanlidis G, Karamitri A, Docherty K, Hazlerigg D. G, Lomax M. A (2007) C / EBPbeta перепрограммирует белые преадипоциты 3T3-L1 на образец экспрессии генов адипоцитов Брауна. J Biol Chem 282: 24660–24669.
41. Каджимура С., Сил П., Шпигельман Б. М. (2010) Транскрипционный контроль развития бурого жира. Cell Metab 11: 257–262.
42. Himms-Hagen J, Melnyk A, Zingaretti M. C, Ceresi E, Barbatelli G, Cinti S (2000) Мультилокулярные жировые клетки в WAT крыс, обработанных CL-316243, происходят непосредственно из белых адипоцитов.Am J Physiol Cell Physiol 279: C670 – C681.
43. Барбателли Г., Мурано И., Мадсен Л., Хао К., Хименес М. и др. (2010) Появление индуцированных холодом коричневых адипоцитов в депо белого жира мышей определяется преимущественно трансдифференцировкой белых и коричневых адипоцитов. Am J Physiol Endocrinol Metab 298: E1244 – E1253.
44. van Rooij E, Olson E.N (2007) MicroRNAs: новые мощные регуляторы сердечных заболеваний и провокационные терапевтические мишени. Дж. Клин Инвест 117: 2369–2376.
45. Ли X, Кэссиди Дж. Дж., Рейнке К. А., Фишбок С., Картью Р. В. (2009) МикроРНК придает устойчивость к колебаниям окружающей среды во время развития. Cell 137: 273–282.
46. Лю Н., Олсон Э. Н. (2010) Регуляторные сети микроРНК в сердечно-сосудистом развитии. Dev Cell 18: 510–525.
47. Kim Y. J, Bae S. W, Yu S. S, Bae Y. C, Jung J. S (2009) miR-196a регулирует пролиферацию и остеогенную дифференцировку в мезенхимальных стволовых клетках, полученных из жировой ткани человека.J Bone Miner Res 24: 816–825.
48. Inokuma K, Okamatsu-Ogura Y, Omachi A, Matsushita Y, Kimura K и др. (2006) Незаменимая роль митохондриального UCP1 в эффекте бета3-адренергической стимуляции против ожирения. Am J Physiol Endocrinol Metab 290: E1014 – E1021.
49. Хименес М., Барбателли Дж., Аллеви Р., Синти С., Сейду Дж. И др. (2003) Нокаут бета-3-адренорецепторов у мышей C57BL / 6J подавляет появление коричневых адипоцитов в белом жире. Eur J Biochem 270: 699–705.
50. Шратт Г. М., Тюбинг Ф., Най Э. А., Кейн С. Г., Сабатини М. Э и др. (2006) Специфическая для мозга микроРНК регулирует развитие дендритных позвонков. Природа 439: 283–289.
51. van Rooij E, Sutherland L.B, Qi X, Richardson J.A, Hill J, Olson E.N (2007) Контроль стресс-зависимого сердечного роста и экспрессии генов с помощью микроРНК. Наука 316: 575–579.
52. Чжао Ю., Рэнсом Дж. Ф, Ли А., Ведантам В., фон Дреле М. и др. (2007) Нарушение регуляции кардиогенеза, сердечной проводимости и клеточного цикла у мышей, лишенных miRNA-1-2.Ячейка 129: 303–317.
53. Nicoli S, Standley C, Walker P, Hurlstone A, Fogarty K. E, Lawson N.D (2010) МикроРНК-опосредованная интеграция гемодинамики и передачи сигналов Vegf во время ангиогенеза. Природа 464: 1196–1200.
54. Zheng Y, Josefowicz S, Chaudhry A, Peng X. P, Forbush K, Rudensky A. Y (2010) Роль консервативных некодирующих элементов ДНК в гене Foxp3 в судьбе регуляторных Т-клеток. Природа 463: 808–812.
55. Штицель М.Л., Сетупати П., Пирсон Д. С., Чайнс П. С., Сонг Л. и др. (2010) Глобальный эпигеномный анализ первичных островков поджелудочной железы человека дает представление о локусах восприимчивости к диабету 2 типа. Cell Metab 12: 443–455.
56. Хаберланд М., Монтгомери Р. Л., Олсон Э. Н. (2009) Многие роли гистоновых деацетилаз в развитии и физиологии: значение для болезни и терапии. Нат Рев Генет 10: 32–42.
57. Акаги Т., Сасай К., Ханафуса Х. (2003) Рефрактерная природа нормальных диплоидных фибробластов человека по отношению к опосредованной онкогеном трансформации.Proc Natl Acad Sci U S A 100: 13567–13572.
58. Хаяси М., Нимура К., Кашиваги К., Харада Т., Такаока К. и др. (2007) Сравнительная роль Twist-1 и Id1 в регуляции транскрипции посредством передачи сигналов BMP. J Cell Sci 120: 1350–1357.
59. Мори М., Накагами Х., Койбути Н., Миура К., Таками Й. и др. (2009) Zyxin опосредует реорганизацию актиновых волокон при эпителиально-мезенхимальном переходе и вносит вклад в морфогенез эндокарда. Mol Biol Cell 20: 3115–3124.
60. Trapnell C, Williams B.A, Pertea G, Mortazavi A, Kwan G, et al. (2010) Сборка и количественная оценка транскриптов с помощью RNA-Seq выявляют неаннотированные транскрипты и переключение изоформ во время дифференцировки клеток. Nat Biotechnol 28: 511–515.
61. Nakagami H, Morishita R, Maeda K, Kikuchi Y, Ogihara T., Kaneda Y (2006) Стромальные клетки, полученные из жировой ткани, как новый вариант для регенеративной клеточной терапии. J Atheroscler Thromb 13: 77–81.
62.Нимура К., Ура К., Ширатори Х., Икава М., Окабе М. и др. (2009) Триметилтрансфераза гистона h4 лизин 36 связывает Nkx2-5 с синдромом Вольфа-Хиршхорна. Природа 460: 287–291.
.
No related posts.

Пушечное сало чем разбавить

Пушечное сало для автомобиля: как обрабатывать, чем разбавить, когда использовать

Что такое пушечное сало для обработки автомобиля

Зачем используется пушечное сало

Обработка пушечным салом автомобиля: инструкция

Обработка пушечным салом. — Лада Калина Универсал, 1.6 л., 2012 года на DRIVE2

Пушечное сало vs Мастика (эксперимент) — Renault Scenic, 1.6 л., 1999 года на DRIVE2

Page 2

D-Day или как я перестал бояться и полюбил ПВК. — УАЗ Patriot, 2.7 л., 2015 года на DRIVE2

Мовиль или пушечное сало. Что лучше? — АвтоЖидкость

Что такое пушечное сало?

Что такое мовиль?

Мовиль или пушечное сало?

Пушечное сало ч.1 — Лада 2114, 1.6 л., 2013 года на DRIVE2

Page 2

Пушсало — что это такое и чем оно нравилось советским автовладельцам и военным | Мир Смазок Все о маслах, смазках

Немного истории

Характеристики и сферы применения пушсала

Про антикор вопросик… | SUZUKI CLUB RUSSIA

Пушсало. Обработка авто. | Свой ремонт авто, покраска, жестянка, видео, pdr

Физиологический процесс похудания | Бюллетень Национального исследовательского центра

Большая жирная ложь — эксперт по питанию, который утверждает, что диеты действительно вызывают увеличение веса

Диета делает вас толстыми — Alternet.org

7 правил покупки здорового йогурта

Калькулятор для разбавления / смешивания — Makimono

Примеры

Разбавляющий уксус

Использование масла и молока для получения жидкости с таким же процентным содержанием жира, что и сливки

Примечания

Математика

Я пробовал Hypercuts Fat Burner Natural [Идентификатор таблетки]

Важная роль miR-196a в коричневом адипогенезе клеток-предшественников белого жира

Abstract

Сведения об авторе

Введение

Результаты

miR-196a индуцирует коричневые адипоцитоподобные клетки в WAT

Мыши miR-196a демонстрируют устойчивость к ожирению и улучшенному метаболизму глюкозы

Hoxc8 нацелен на C / EBPβ в сотрудничестве с HDAC3 для регуляции генов коричневого жира

Обсуждение

Материалы и методы

Заявление об этике

Плазмиды

Анализ экспрессии генов

РНК-seq

Культура клеток

Вестерн-блоттинг

Иммуноцитохимия

Мыши

Гистологический анализ

miRNA Гибридизация in situ

Метаболические измерения

Анализы Native ChIP

Люциферазные анализы

Анализ иммунопреципитации

Статистика

Регистрационный номер

Дополнительная информация

Рисунок S1.

Рисунок S3.

Рисунок S4.

Рисунок S5.

Рисунок S6.

Рисунок S7.

Рисунок S8.

Рисунок S9.

Рисунок S11.

Рисунок S12.

Благодарности

Вклад авторов

Ссылки

Ответить Отменить ответ